Delitos Sexuales

PRÁCTICA 5. DELITOS SEXUALES: DETERMINACIÓN DE CÉLULAS ESPERMÁTICAS. P30 Y DETERMINACIÓN DE FOSFATASA ACIDA.
Objetivo El alumno identifica elementos esenciales, en los indicios recolectados en caso de delitos sexuales desde el laboratorio forense.

Sustento teórico Fosfatasa ácida. La fosfatasa ácida prostática es una isoenzima, localizada principalmente en la próstata, si bien puededetectarse también en menor cantidad en leucocitos, páncreas, bazo y vesícula biliar. Es una fosfomonesterasa no específica que se almacena en los lisosomas y es secretada por la glándula prostática, se encuentra en grandes cantidades en el líquido seminal: [1] Fosfatasa ácida prostática en suero 0.0-1.2 g/L [1]

Fosfatasa acida prostática en semen 1g/L [1] El principio de los métodos de identificaciónse basa en que la fosfatasa acida cataliza en medio acido la hidrólisis del alfa-naftil fosfato, produciendo alfanaftol el cual reacciona con una sal de diazonio formando un cromógeno purpura [2]. AcP α -naftilfosfato + H2O ——→ α-Naftol + PO42[2-4]

La fosfatasa ácida hidroliza al α-naftilfosfato, formando α-naftol, el cual reacciona inmediatamente con el rojo de TR de adherencia rápida,produciendo la coloración [1,3]. P30 También conocida como Antígeno Prostático Especifico (PSA) es una enzima proteínica constituida por 240 aminoácidos que forman una cadena polipeptídica simple presente en el fluido seminal con una vida media de 3 días con peso molecular de 34,000 Dalton, y fue llamada P 30 [5-8]. Se localiza en el retículo endoplásmico, vesículas citoplasmáticas y vacuolas de lascélulas epiteliales prostáticas. La gran importancia del PSA radica en que se encuentra exclusivamente en el tejido prostático, bien sea normal, hiperplásico o maligno, no se detecta en suero femenino y los falsos positivos, procedentes de otros tejidos humanos benignos o malignos, son escasos [5-8]. Idealmente cuando una eyaculación ocurre, se puede identificar los espermas en la muestra; sin embargo,en muestras azoospermias, o contaminadas por bacterias o levaduras es muy útil realizar la fosfatasa acida y la PSA. El tiempo promedio en que desaparece la fosfatasa en muestras vaginales es de 14 horas mientras que la PSA se puede encontrar hasta las 27hrs [5-8]. En el caso de la p 30 la prueba se fundamenta en una reacción antígenoanticuerpo. Si se encuentra presente en el espécimen estereaccionará con el móvil monoclonal antihumano p30 formando un complejo de antígeno-

anticuerpo. Este móvil emigra a través del dispositivo absorbente hacia un área de prueba donde un anticuerpo monoclonal p30 antihumano se encuentra

inmovilizado. Este anticuerpo inmovilizado captura el complejo antes mencionado para formar un complejo ―anticuerpo–antígeno–anticuerpo‖ [5-8].

Microscopia Lamejor manera de identificar el semen es con el microscopio. La morfología y dimensiones del espermatozoide humano son únicas [9-12]. El esperma es pequeño y si ha perdido su cola pueden dificultar la identificación en la muestra, especialmente si está contaminada con bacterias o levaduras. La detección se simplifica por medio de tinciones. La más común en el laboratorio forense y tomando en cuentalas características antes mencionadas es la de de árbol de navidad por los colores brillantes que presenta. Se utiliza el rojo nuclear que tiñe diferencialmente el ADN contenido en la cabeza del esperma de un carmesí brillante y una contra tinción de verde picroindigocarmin que tiñe las colas de verde. Se usa también la tinción de hematoxicilina-eosina y la tinción con Giemsa [9-12]. En el caso dela tinción de árbol de navidad, una técnica utilizada principalmente en histología para colorear células diferenciando su núcleo de las demás estructuras, encontramos que los colorantes nucleares deben sus características a sus cargas eléctricas positivas los cuales son sales que poseen la base coloreada y la porción ácida incolora. Lo cual los hace afines a los ácidos nucleicos (DNA y RNA)...