Diagnostico De Laboratorio De Las Micobacterias

Diagnóstico de laboratorio
El pilar del diagnóstico de la TB se basa en la identificación del agente causal: el Complejo Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis var BCG, M. canetti, M. africanum, M. pinnipeda, M. microti, M. mungi).
Las muestras a analizar pueden ser de origen respiratorio (esputo normal o inducido, contenido gástrico, lavado bronquial ybroncoalveolar, biopsias endoscópicas o quirúrgicas,) o no respiratorias (orina, LCR, sangre y médula ósea en inmunodeprimidos, punciones aspirativas y biopsias).
Métodos bacteriológicos clásicos:
Baciloscopía10: examen microscópico de extendido de esputo, líquidos de punción, material purulento, homogeneizados de tejidos. Las dos técnicas más comunes son la tinción de Ziehl Neelsen, que muestra la ácidoalcohol resistencia, y la microscopía de fluorescencia con fluorocromo auramina-rodamina B y microscopios LED (light emision diode) donde se aprecian los bacilos como puntos brillantes sobre fondo negro.
La baciloscopía se cuantifica en cruces luego de la lectura de por lo menos 100 campos microscópicos:
+++: más de 10 baar x campo.
++: 1-10 baar x campo.
+: 1-10 baar x 10 campos
Número debaar en 100 campos (1-10)
Se considera positiva la baciloscopía con más de 5 bacilos por 100 campos. Menor cantidad puede informarse y el médico la considerará en el contexto clínico.
La baciloscopía de la primera muestra arroja el 80% del rendimiento en los pacientes con lesiones moderadas .Aunque se aconsejan como mínimo efectuar dos baciloscopías (esputo seriado), una primer muestrapositiva analizada estrictamente es altamente sugestiva de TB11 y no es necesario efectuar una segunda .
Cultivo3: permite la identificación de género y especie a través de pruebas bioquímicas (catalasa, niaci7 Guías de diagnóstico, tratamiento y prevención de la tuberculosis HOSPITAL MUÑIZ / INSTITUTO VACCAREZZA
na y nitrato reductasa) o moleculares, confirmando el diagnóstico de enfermedad. En elestado del arte actual del diagnóstico de la TB es conveniente contar con la identificación del complejo M. tuberculosis y una prueba de sensibilidad como mínimo a R o a H y R.
Existen dos tipos de medio de cultivo, sólidos y líquidos. En los primeros el desarrollo es más lento (mínimo 20 días a partir de baciloscopías ++ o +++) pero puede visualizarse la morfología de las colonias. Se considerapositivo un cultivo con más de 10 colonias aunque los de menor número deben considerarse en el contexto clínico. Los medios líquidos permiten un desarrollo más rápido de las micobacterias (son la base de los métodos denominados rápidos) pero no se aprecia la morfología de las colonias. Previo a la siembra el material debe decontaminarse (por ejemplo con el método de Petroff, NaHO al 4%).
Losmedios sólidos usualmente empleados son el Lowenstein Jensen y Stonebrink en base a huevo y el Middlebrook 7H10 en base a agar. Existen varios medios líquidos en base a caldo, entre ellos el de Dubos y el Middlebrook 7H12.
Los métodos automatizados como el BACTEC MGIT 960 (en la actualidad el método rápido de referencia), utilizan medio líquido y un revelado de desarrollo bacteriano porfluorescencia permitiendo en 10-13 días obtener resultados positivos. Los negativos se observan hasta 42 días.
Por último existe la posibilidad de identificación del complejo M. tuberculosis sin necesidad de cultivo a través de la amplificación de material genético bacilar de las muestras por PCR e identificación por hibridación de sondas de ADN. La altísima sensibilidad de la PCR exige para evitar falsospositivos trabajar solamente con muestras que tengan baciloscopías positivas.
Pruebas de sensibilidad: se aconseja el estudio como mínimo de la resistencia a R o mejor a H y R en todos los casos de TB pulmonar bacilífera.
El estándar de oro es el método de las proporciones de Canetti, Rist y Grosset (1963)12, en el que se mide el desarrollo micobacteriano en tubos con concentraciones...