Diseño De Laboratorio De Cultivos Celulares
Páginas: 13 (3135 palabras)
Publicado: 21 de septiembre de 2011
Diseño de laboratorio de cultivos celulares.
Aspectos generales.
Un laboratorio de cultivos celulares se constituye como un lugar de características únicas debido a los requerimientos necesarios para llevar a cabo la obtención, el cultivo y el mantenimiento de las células in-vitro.
La característica y exigencia más importante de los cultivos celulares sobre la cual pivotan el diseño, laubicación del laboratorio y los equipos a utilizar es el mantenimiento de la asepsia.
La asepsia es necesaria para la obtención de cultivos libres de contaminación, principalmente microbiana y fúngica, que pueda impedir o alterar el normal comportamiento de las células in-vitro.
La tasa de crecimiento de las células en cultivo es muy inferior a la de los contaminantes habituales: hongos,levaduras, bacterias y micoplasmas, y por ello para el mantenimiento del cultivo es de vital importancia evitar la aparición de microorganismos indeseados.
No resulta económicamente viable crear grandes áreas estériles, pero es importante que el laboratorio sea libre de polvo y demás posibles fuentes de contaminación.
El área de trabajo para realizar cultivos (zona estéril) debe instalarseen una parte del laboratorio tranquila, alejada de las vías de paso, y a ser posible dedicada exclusivamente al cultivo de células (una habitación aislada es lo ideal).
La aparición de cabinas de flujo laminar ha simplificado el problema de la esterilidad, y ha reducido las necesidades de aislamiento del área de trabajo, pero es recomendable mantener un gradiente de esterilidad, desde el medioexterior o laboratorio general (zona limpia) al interior de las cabinas de flujo donde se manipularan los cultivos y del incubador donde se mantendrán.
El gradiente de esterilidad de un laboratorio se puede definir como el gradiente de “posibilidades de contaminación” que necesariamente se forma en una sala de cultivos celulares desde la puerta de entrada (la parte teóricamente mas “sucia”)hasta las zonas mas internas y mas aisladas que serian los lugares teóricamente mas “limpios”. Entre estos extremos se establece el gradiente de esterilidad que debe ser respetado a la hora de colocar todos los equipos y dispositivos necesarios en el laboratorio.
Las necesidades de asepsia dependen del tipo de material que se va a procesar en el laboratorio. Esto define dos tipos de contencióny áreas de trabajo diferentes:
1. El laboratorio de cultivo de tejidos (o células) general, para la manipulación de tejidos no patógenos, se instala preferentemente en una sala aislada a la cual se le suministra aire filtrado (con los estándares industriales habituales o de oficina – aire acondicionado). Esto produce un aumento de presión atmosférica en el interior del laboratorio (15 mm a 20mm de Hg.) que impide la entrada de aire no filtrado al área limpia.
2. El laboratorio de cultivo con patógenos supone un nivel de contención superior. Para evitar la salida accidental de estos agentes se filtra el aire que sale, generando un déficit de presión en el interior. El aire sale siempre estéril.
Aspectos a tener en cuenta en la construcción.
- Debe suministrarse aire filtradoa las diferentes salas o cuartos, los cuales deben diseñarse para ser limpiados fácilmente.
- Los equipos deben “encajar” perfectamente en el suelo, con un espacio para la limpieza.
- El suelo debe cubrirse con vinilo u otro material a prueba de polvo, y construirse con una pequeña pendiente hacia un desagüe en el piso situado hacia el lado de la puerta. Este arreglo permite el uso librede agua si el suelo debe lavarse, y lo que es más importante, protege los equipos de inundaciones remanentes.
- Si es posible, separar el área de trabajo para realizar cultivos (zona estéril) de las áreas de preparación, lavado y esterilización (zona limpia)
- Lo servicios requeridos incluyen energía, gas combustible (metano o propano domestico), CO2, aire comprimido y una línea de vació....
Aspectos generales.
Un laboratorio de cultivos celulares se constituye como un lugar de características únicas debido a los requerimientos necesarios para llevar a cabo la obtención, el cultivo y el mantenimiento de las células in-vitro.
La característica y exigencia más importante de los cultivos celulares sobre la cual pivotan el diseño, laubicación del laboratorio y los equipos a utilizar es el mantenimiento de la asepsia.
La asepsia es necesaria para la obtención de cultivos libres de contaminación, principalmente microbiana y fúngica, que pueda impedir o alterar el normal comportamiento de las células in-vitro.
La tasa de crecimiento de las células en cultivo es muy inferior a la de los contaminantes habituales: hongos,levaduras, bacterias y micoplasmas, y por ello para el mantenimiento del cultivo es de vital importancia evitar la aparición de microorganismos indeseados.
No resulta económicamente viable crear grandes áreas estériles, pero es importante que el laboratorio sea libre de polvo y demás posibles fuentes de contaminación.
El área de trabajo para realizar cultivos (zona estéril) debe instalarseen una parte del laboratorio tranquila, alejada de las vías de paso, y a ser posible dedicada exclusivamente al cultivo de células (una habitación aislada es lo ideal).
La aparición de cabinas de flujo laminar ha simplificado el problema de la esterilidad, y ha reducido las necesidades de aislamiento del área de trabajo, pero es recomendable mantener un gradiente de esterilidad, desde el medioexterior o laboratorio general (zona limpia) al interior de las cabinas de flujo donde se manipularan los cultivos y del incubador donde se mantendrán.
El gradiente de esterilidad de un laboratorio se puede definir como el gradiente de “posibilidades de contaminación” que necesariamente se forma en una sala de cultivos celulares desde la puerta de entrada (la parte teóricamente mas “sucia”)hasta las zonas mas internas y mas aisladas que serian los lugares teóricamente mas “limpios”. Entre estos extremos se establece el gradiente de esterilidad que debe ser respetado a la hora de colocar todos los equipos y dispositivos necesarios en el laboratorio.
Las necesidades de asepsia dependen del tipo de material que se va a procesar en el laboratorio. Esto define dos tipos de contencióny áreas de trabajo diferentes:
1. El laboratorio de cultivo de tejidos (o células) general, para la manipulación de tejidos no patógenos, se instala preferentemente en una sala aislada a la cual se le suministra aire filtrado (con los estándares industriales habituales o de oficina – aire acondicionado). Esto produce un aumento de presión atmosférica en el interior del laboratorio (15 mm a 20mm de Hg.) que impide la entrada de aire no filtrado al área limpia.
2. El laboratorio de cultivo con patógenos supone un nivel de contención superior. Para evitar la salida accidental de estos agentes se filtra el aire que sale, generando un déficit de presión en el interior. El aire sale siempre estéril.
Aspectos a tener en cuenta en la construcción.
- Debe suministrarse aire filtradoa las diferentes salas o cuartos, los cuales deben diseñarse para ser limpiados fácilmente.
- Los equipos deben “encajar” perfectamente en el suelo, con un espacio para la limpieza.
- El suelo debe cubrirse con vinilo u otro material a prueba de polvo, y construirse con una pequeña pendiente hacia un desagüe en el piso situado hacia el lado de la puerta. Este arreglo permite el uso librede agua si el suelo debe lavarse, y lo que es más importante, protege los equipos de inundaciones remanentes.
- Si es posible, separar el área de trabajo para realizar cultivos (zona estéril) de las áreas de preparación, lavado y esterilización (zona limpia)
- Lo servicios requeridos incluyen energía, gas combustible (metano o propano domestico), CO2, aire comprimido y una línea de vació....
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