El macrófago como sistema inmunológico y su evaluación en la producción de NO

El macrófago como sistema inmunológico y su evaluación en la producción de NO

A. Introducción
La presente practica se encarga del aislamiento de macrófagos mediante la infección de ratas con laprevia suministración de un lisado de bacterias, como sabemos un macrófago no es más que una célula, son los glóbulos blancos de la sangre los cuales son especializados en la digestión de partículas yson distribuidos indistintamente en la sangre y tejidos y por lo tanto participan en la defensa, tanto en la respuesta inmune adaptativa, como en la respuesta inmune innata, a través de la ingestiónde patógenos, estas células también participan en el importante rol de limpieza de células dañadas o muertas.
En lo referido a la formación del oxido nítrico vemos que esta se da sobre todo por lainteracción de el LPS de la bacteria gran (–) con su PRR, esto estimula de vías de señalización activándose un gen de respuesta inflamatoria que codifica para la formación del iNos (óxido nítricoinducible), este actúa sobre un sustrato que es el aminoácido (L-arginina) convirtiéndola en citrulina que al salir de la célula se transforma en el oxido nítrico que resulta formar parte de lo que son losradicales libres de oxígenos que sirven dentro del organismo como un microbicida.
B. Materiales y métodos
MATERIALES
Ratas adultas.
Cultivo de bacterias (E.coli).
Jeringas hipodérmicas
Pipetaspasteur
Pipetas de 1,2 y 5 ml
NaCI 0.9 % y NaCI 1.8 %.
Sulfanilamida
Naftilendiamina
Medio de Cultivo RPMI 1640
Placa de petri


MÉTODOS
Primeramente se procede a colocar bacterias, en estecaso la E. Coli, sobre una placa de petri a modo de cultivo de bacterias y re suspenderlas en un tubo de ensayo que contiene suero fisiológico para el posterior calentamiento hasta la ebullición, estaacción se repite unas 3 veces teniendo cuidado que el contenido no se proyecte, luego se procede a inyectar esta solución intraperitonialmente a los ratones con 1.0 ml de lisado bacteriano (figura...