Elaboracion De Un Protocolo
Objetivos: separar pigmentos como clorofila y carotenos de vegetales, empleando la cromatografía ascendente con un tiempo decorrimiento de 20-50 minutos.
Fundamentos: El botánico ruso Mikhail S. Tsvet formalizo el uso de la cromatografía en los estudios científicos por el año 1910 dio ese nombre a la técnica y laaplico a la separación de los pigmentos naturales que se encuentran en las plantas ( conocidos como carotenoides y clorofilas ).
La cromatografía es la distribución de los componentes de una mezclaentre dos fases: una móvil y una fija o estacionaria. Por lo tanto hay dos fases, una de esas fases constituye una fase estacionaria, de gran superficie ( papel cromatografico ), la otra es un fluido (gas o liquido ) que se mueve a través o a lo largo de la fase estacionaria.
Los pigmentos vegetales, pueden dividirse en dos grandes grupos, en base a su solubilidad:
Solubles en agua: antocianinasy antoxantinas, que se encuentran en el jugo vacuolar.
Solubles en solventes organicos: clorofilas “a” y “b” y carotenoides ( rojo, naranja y amarillo ), que se encuentra en las granas y tilacoidesde los cloroplastos. Son los responsables de la captación de la energía luminosa en el proceso de la fotosíntesis.
MATERIALES:
1 gradilla
Bolsas negras
Mortero y pistilo
Lámpara rayosUV
Cámara cromatografica con todos los aditamentos
Papel para cromatografía de 25 x 25 cm
4 tubos de ensayo
1 pipeta de 10 ml
1 pipeta de 5 ml
Sustancias y reactivos:
Espinacas frescas. Puréde zanahorias. Pure de tomate.
Acetona.
Solvente: acetona: éter de petróleo 10:90 por volumen.
Metodología: Se cortan los trozos de espinaca ( 1-2 cm. Aprox ), a continuación se trituraran conel mortero y se les agrega 4ml de acetona, tape y agite vigorosamente por 10 seg. Dejar reposar 10 min. Adicionar 4 ml de agua destilada y agitar al tubo de ensaye, se deja reposar unos minutos ( 20...
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