erlenmeyer
Preparación del eluyente (disolvente de arrastre)
El eluyente empleado es agua/1-propanol/acetona (1:1:1), se preparan unos 100 ml y se lava la columna con eldisolvente.
Preparación de la mezcla a separar
Es una mezcla de fluoresceína, fucsina básica y azul de metileno. Se toman 0,5 ml de cada uno de ellos y se mezclan en un tubo de ensayo.
Desarrolloo elución
Cuando el eluyente haya descendido 0,5 cm de la parte superior del relleno, se añaden dos gotas de la mezcla a eluir. Se pone una pequeña bolita de algodón en la parte superior de lacolumna y a continuación se añade eluyente, manteniendo el nivel varios cm por encima del relleno. Al desarrollarse la cromatografía, se separan las fracciones, que se recogen en distintos matraces,contando el tiempo que tarda cada componente en salir (tiempo de retención).
Si algún componente no sale puede arrastrarse, añadiendo al eluyente ácido acético diluido.
Hacer dibujos donde figurenclaramente coloreadas las separaciones de colorantes, con esquemas de las distancias recorridas cada intervalo de tiempo (20-25 minutos) y los tiempos de retención para una cierta longitud de columna (10cm).
5. Cuestiones
a) La cromatografía en columna, sus características y aplicaciones. Cromatografia de adsorción. Cromatografía de partición.
b) Eluyentes y soportes para cromatografía encolumna.
c) Factores que influyen en una separación por cromatografía en columna.
Cromatografía en Columna.
Separación de colorantes
1. Objetivos
Manejo de técnicas de separación. Introduccióna las sofisticadas técnicas de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y cromatografía de gases (GC).
Objetivo operativo: Separación de los componentes de una mezcla de colorantes.
2.Fundamento teórico
La cromatografía en columna es la técnica de separación e identificación de sustancias químicas, por la diferente retención que experimentan los componentes de una mezcla, al ser...
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