Espectrofotometría Hemoglobina

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UNIVERSIDAD AUSTRAL DE CHILE
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FACULTAD DE CIENCIAS-------------------------------------------------
BACHILLERATO EN CIENCIAS
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ESCUELA DE BIOQUIMICA

Espectros de Absorción de la Hemoglobina y sus Derivados

Génesis Vega
Daniel UribeInstrumentación Bioquímica (BIOQ251)

Valdivia, 08 de abril 2011

OBJETIVOS
1. Con una solución de hemolizado de glóbulos rojos obtener espectros de absorción de la oxihemoglobina tantoconcentrada como diluida.
2. Hacer una comparación de los dos espectros obtenidos de la oxihemoglobina, con los espectros de los derivados de la hemoglobina.
3. Obtener la concentración de la muestra apartir de los espectros.

RESULTADOS
A continuación se adjuntan los espectros obtenidos en el laboratorio de la oxihemoglobina y sus derivados (desoxihemoglobina y metahemoglobina); estos últimosfacilitados por los demás grupos. Para cada muestra se obtuvieron espectros de oxi, desoxi y meta-hemoglobina tanto concentrada, como diluída 10 veces en solvente de NaCl 0,15 M. La concentrada seobtuvo dentro de un rango de 450 nm y 650 nm, mientras que la diluída se hizo en un rango de 350 nm y 650 nm, con el fin de incluir la banda de soret, característica en los 400 nm de los grupos hemo.Tabla I
Comparación de valores de longitudes de onda de datos experimentales y de la literatura de la hemoglobina y sus derivados.
Hb | Muestras concentradas | Muestras diluidas** | Datosde literatura*** | Color observado |
| λ (nm) | λ (nm) | ε (cm-1mM-1) | λ(nm) | |
Oxihemoglobina | 541576 | 414* | 13,814,6128 | 541577415* | Rojo pálido |
Desoxihemoglobina | 555 | 430* |12,5133 | 555430* | Rojo |
Metahemoglobina | 500630 | 405* | 10,04.4179 | 500631405* | Amarillo ocre |
* Banda de Soret de los espectros medidos diluidos y de los datos de literatura.
** Muestras...