Esterilización De Medios De Cultivo

ESTERILIZACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
Introducción
La esterilización es un proceso de suma importancia para la industria de las fermentaciones. Conceptualmente esterilización:
Es la eliminación completa, ya sea por destrucción o por separación, de toda forma de vida de un objeto o material. Como desgraciadamente la única prueba de supervivencia para un microorganismo es su desarrollo en unmedio de cultivo adecuado, no podemos distinguir entre esterilización y cualquier otro proceso que sin matar a los microorganismos les haga perder su capacidad de reproducirse.
Desde el punto de vista industrial es suficiente que en un medio de cultivo sometido a un ciclo de esterilidad no se verifique el desarrollo de ningún tipo de microorganismo.
Asepsia: es la exclusión continua de aquellosmicroorganismos no deseados.
Razones para esterilizar:
a) Para prevenir la transmisión de enfermedades
b) Para prevenir la descomposición de materiales por microorganismos
c) Para eliminar la competencia por los nutrientes en un medio de fermentación u permitir así el desarrollo especifico de un solo tipo de microorganismo de interés industrial, ya que sea por ellos
Los materiales aesterilizar pueden ser de diversos tipos y para distintos usos, por ejemplo:
Sólidos
Equipos permanentes
* Instrumentos y aparatos de uso microbiológico
* Ropa para uso en áreas estériles
* Plantas de manufactura para productos farmacéuticos
* Fermentadores
* Equipos para llenado de ampollas
Equipos y materiales descartables
* Hilo de sutura de uso quirúrgico
*Jeringas descartables, etc.
Líquidos
Productos farmacéuticos
* Sólidos de uso parenteral: antibióticos, etc.
Líquidos de procesos
* Medios de cultivo de laboratorio
* Caldos de fermentación
* Nutrientes y precursores para fermentación
* Agua estéril pera procesos
Gas
Productos farmacéuticos
* Soluciones para cristalización estéril
* Líquidos parenterales
Aire
*Para áreas estériles
* Para aireación en fermentación
* Para trasvasar líquidos estériles por presión cuando es importante prevenir riesgos de incendio
Métodos de esterilización
Se pueden clasificar en tres tipos según el efecto producido sobre los microorganismos:
* Destrucción
* Muerte o inactivación
* Remoción física
Los del segundo grupo son las más utilizadas paramedios de fermentación y se puede dividir a su vez en:
* Calor húmedo
* Fuentes de alta energía, (radiación ionizante, UV, etc.)
* Métodos químicos

De los nombrados, el calor húmedo es el más ampliamente usado y es además el más sencillo de controlar. El mayor problema que presenta su utilización es el cálculo del tiempo mínimo de calentamiento que asegure asepsia y que no produzcauna desnaturalización de las sustancias que componen el medio de cultivo. Este tiempo depende del volumen/área de intercambio de calor. Para independizarse de estas variables se utiliza un método que se basa en la evolución de las condiciones térmicas necesarias para destruir una determinada cantidad de microorganismos.
Relaciones cinéticas
Para los cálculos utilizados en este modelo se hanempleado esporas de Bacillus subtilis, microorganismo comúnmente encontrado en el suelo es una bacteria Gram positiva, tiene la habilidad para formar una resistente espora protectora, permitiendo al organismo tolerar condiciones ambientalmente extremas. Las relaciones entre el número de esporos viables y el tiempo de exposición al calor muestran una relación logarítmica de destrucción (cinética deprimer orden). En la siguiente figura se muestra una curva típica de destrucción para diferentes temperaturas para Bacillus subtilis. Se puede apreciar que a 121°C la destrucción de esporas es aproximadamente 200 veces más rápida que a 105°C.

Curvas de destrucción a diferentes temperaturas de Basillus subtilis.
Esterilización en lote
Este es el método más común para esterilización de medios de...