extraccion de ADN

Objetivos

-Realizar la extracción de ADN de tejidos animales y vegetales y reflexionar sobre la simpleza de su composición con sencillas técnicas.

- Observar la estructura fibrilar del ADN.- Establecer la relación entre el proceso de extracción y propiedades quimico-fisicas del ADN

Material necesario
- platano

- Agua (destilada o mineral)

- Sal de mesa

- Bicarbonato sódico- lavalozas

- Alcohol isoamílico a 0°C

- Batidora

- Nevera

- Colador
- Vaso

- Tubo de ensayo

- Varilla fina
Procedimiento
1.- Preparar el tampón con los siguientesingredientes y mantener en la nevera o en un baño de hielo triturado:

120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.

1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.

5 g debicarbonato sódico.

5 ml de lavaloza

2-. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la cocina y cortarla en cuadraditos.

3.- Triturar la muestracon un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Y así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente.

4.- Mezclar en unrecipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolopasar por un colador lo más fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante.

5.- Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir conpipeta 10 ml de alcohol isoamílico enfriado a 0ºC. Se tiene que dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol va a quedar flotando sobreel tampón.

6- Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán...