Factor Reumatoide

DETERMINACIÓN DE FACTOR REUMATOIDE

OBJETIVO: Que el alumno sea capaz de realizar la determinación de factores reumatoides a partir de la técnica cuantitativa y semicuantitativa.

INTRODUCCIÓN
El factor reumatoide (FR) es una prueba serológica inmunológica, que mide la presencia y nivel de la IgM específica contra las inmunoglobulinas IgG anormales, producidas por los linfocitos de lamembrana sinovial de las articulaciones de personas afectadas por la Artritis Reumatoide, esta enfermedad puede tener dos orígenes: bacteriano y autoinmune. El factor reumatoide es un tipo de autoanticuerpo producido contra la porción Fc de la inmunoglobulina G (Ig G). Cuando se originan estas inmunoglobulinas IgG y se fija la IgM, se forman inmunocomplejos IgG-IgM que activan el Complemento y otrosfactores inflamatorios que producen secundariamente la destrucción de las articulaciones afectadas. Por ello se le llama una enfermedad autoinmune, ya que es el sistema inmunitario del individuo el que destruye tejidos del propio cuerpo.
Un resultado de más de 40 UI pudiera considerarse anormal, los resultados pueden llegar hasta las 2000 UI o más. El FR a veces puede indicar la actividad de laenfermedad. El FR no es específico de la artritis reumatoide y puede elevarse debido a una infección, gripe, etc. Los títulos se encuentran elevados en ciertas patologías reumáticas y en algunas infecciones crónicas. La AR nunca se diagnostica basándose únicamente en este análisis.
El test fue desarrollado por primera vez por el Dr. Eric Waaler en 1940 y posteriormente por el Dr. H.M Rose.FUNDAMENTO DE LA PRÁCTICA

El factor reumatoide del suero es la expresión del sistema inmunológico de un individuo que reacciona ante la presencia de una inmunoglobulina que es reconocida como "no propia". Esta respuesta de inmunoglobulina "no propia" resulta en presencia de complejos inmunes. Estos a su vez, fijan el complemento y pueden eventualmente conducir a la destrucción del cartílago y elhueso. Es un anticuerpo poliespecífico, que activa el complemento.
La prueba de aglutinación con partículas de látex es hoy en día el método más empleado para la detección del factor reumatoide, la gammaglobulina agregada es absorbida sobre las partículas de látex. El factor reumatoide es una técnica de aglutinación que se produce cuando las partículas de látex recubiertas con gamma-globulinahumana entran en contacto con factores reumatoides que se encuentran presentes en el suero del paciente. Es entonces una reacción inmunológica entre el látex sensibilizado con gammaglobulina humana y el factor reumatoide presente en el suero del paciente. Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos dirigidos contra la fracción de Fc de las inmunoglobulinas G.

MATERIAL

• Placas devidrio con divisiones.
• Pipeta automatizada.
• Aplicadores de madera.
• Tubo Vacutainer sin anticoagulante.
• Fuente luminosa (lámpara).
• Centrifuga.

REACTIVOS

• Reactivo de FR látex.

MUESTRA BIOLOGICA
• 6 ml de sangre.

TÉCNICA (DESARROLLO DE LA PRÁCTICA)

1. Obtener 6 ml de sangre y colocarlo en un tubo sin anticoagulante.

NOTA: El paciente debe de estar en ayuno.
2.Dejarlo reposar hasta que se separen los eritrocitos del suero.

3. Centrifugar por 40 segundos a 3500 RPM.

4. Extraer el suero tratando de no mezclarlo con los eritrocitos y colocarlo en un tubo de ensayo limpio


• Técnica cualitativa (en placa).

1. Con ayuda de una pipeta, colocar 50 µL del suero en una división de la placa

2. Colocar una gota del reactivo.

3. Mezclarperfectamente bien con un aplicador de madera limpio.

4. Mezclar la placa por rotación (120 RPM) durante 2 a 3 minutos.

5. Observar con ayuda de una lámpara si hubo algún tipo de aglutinación

NOTA: Para una mayor precisión observar al microscopio en objetivo de 10X.

 Técnica semicuantitativa (en tubo de ensayo).

1. Si hay reacción positiva, se colocan en un tubo de ensayo limpio...