Fosfatasa

INTRODUCCION:

Las fosfatasas ácidas se encuentran presentes en casi todos los tejidos del organismo, siendo particularmente altas sus cantidades en próstata, estómago, hígado, músculo, bazo,eritrocitos y plaquetas.
Se ha visto que en individuos con carcinoma de próstata, se produce una elevación en los niveles de la enzima en suero, como consecuencia del aumento de isoenzima prostática.Cuando no se ha producido metástasis y el tumor se encuentra circuns-cripto a la glándula, el incremento será pequeño o nulo. En cambio, éste será importante cuando existe compromiso de otros tejidos,especialmente, el óseo.
En principio, se pensó que la fracción tartrato lábil era específica de próstata. Hoy se sabe que existen fosfatasas ácidas tartrato lábiles de origen no prostático.
OBJETIVO:Que el alumno aprenda a realizar la determinación de la concentración de Fosfatasa Total en suero.

FUNDAMENTO:
AcP
α -naftilfosfato + H2O ——→α-Naftol + PO42-
α-Naftol + Rojo de TR de adherencia rápida ———→ Colorante diazoico

La fosfatasa ácida hidroliza al α-naftilfosfato, formando α-naftol, el cual reacciona inmediatamente con el rojode TR de adherencia rápida, produciendo un colorante que se absorbe a 405 nm. El índice de incremento en absorbancia a 405 nm es proporcional a la actividad de la fosfatasa ácida. Si se agregaL-tartrato al reactivo, la fosfatasa ácida prostática se inhibe, pero todas las demás fosfatasas ácidas en el suero reaccionan. Por tanto, la prueba se realiza tanto en presencia como en ausencia delL-tartrato. La diferencia en la actividad entre los dos análisis es igual a la actividad de la fosfatasa ácida prostática en el suero.
MATERIAL:
* Celdas para Espectrofotómetro.
* Espectrofotómetro.* Baño María.
* Pipeta Automatizada.
* Muestra sanguínea en tubo seco.
* Barril para jeringa Vacutainer.
* Jeringa Vacutainer.
* Ligadura.
* Guantes.

TÉCNICA:
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