Genética Humana

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CIUDAD JUÁREZ INSTITUTO DE CIENCIAS BIOMÉDICAS DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUÍMICO-BIOLÓGICAS PROGRAMA DE BIOLOGÍA

MANUAL DE PRÁCTICAS GENÉTICA HUMANA

MANUAL DE PRÁCTICAS DE GENETICA HUMANA COMPILADORES: Principal: M. en C. Rocio Cortes Rodríguez Colaboradores: M. en C. Rocio Cortes Rodríguez Revisado por: Academia de Biologia 2011 Ciudad Juárez, Chihuahua UniversidadAutónoma de Ciudad Juárez 2009 p. 68

M. en C. Emilio Clarke Crespo Coordinador de la Academia de Biología

D. Ph. Antonio de la Mora Covarrubias Coordinador del Programa de Biología

Dr. Alejandro Martínez Martínez Jefe del Departamento de Ciencias Químico-Biológicas

M.C. Hugo Staines Orozco Director del Instituto de Ciencias Biomédicas

Aprobados por la Academia de Biología, 2011CONTENIDO Practica 1: Extraccion de DNA…………………………………………………………..3 Practica 2: Corrimiento de Acidos Nucleicos…………………………………………..9 Practica 3: El cariotioi humano…………………………………………………………11 Practica 4: Simulacion de errores durante el proceso de replicacion...……………14 Practica 5: Digestion del DNA con endonucleasas de restriccion………………….19 Practica 6: Southern blotting……………………………………………………………23 Practica7: Transformacion de celulas bacterianas…………………….……………28 Practica 8: Fundamentos de la clonacion……………………………………………..32 Practica 9: Regulacion genica en procariotes………………………………………...37 Practica 10: Factores involicrados en la regulacion de la transcripcion genica en eucariotas y sus funciones……………………………………………………………...43 Practica 11: Biologia genomica………………………………………………………...48 Practica 12: Estudiogenealogico en el genoma humano…………………………...50 Practica 13: Estudio de la herencia poligenica………………………………………56 Practica 14: Estudio de los polimorfismos del grupo sangineo……………………..63 Pracitca 15: Tecnica del aplastamiento para el estudio de los cromosomas……..66
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Pracitca 1 EXTRACCION DE DNA Objetivo: Que el alumno aprenderá sobre la extracción de DNA y la electroforesis.Introducción Extracción de DNA El concepto básico de la extracción de DNA se puede dividir en 5 pasos: 1) Ruptura de las células.- es casi virtualmente posible obtener DNA de todas las células que se conocen, únicamente tendrá que adaptarse a las necesidades y facilidades para escoger los métodos de lisis celular. Entre los mas utilizados están: a) Los detergentes.- El uso de detergentes es útilpara extraer DNA especialmente de parásitos, células en cultivo y tejido. b) Enzimas.- cuando se trata de extracción de DNA en bacterias, se utiliza la lisosima que es una enzima que se encuentra en varias secreciones del cuerpo humano como lagrimas y moco, y en la clara de huevo. Actúa desestabilizando la pared celular bacteriana cuando rompe las uniones glucosidicas entre los polisacáridos. 2)Eliminación de proteínas.- para eliminar las proteínas se utilizan enzimas proteolíticas, como la pronasa, la cual es activa contra un amplio espectro de proteínas naturales. 3) Eliminación de ARN.- Una vez concluida la digestión con las proteasas, se realiza la digestión con una RNasa para eliminar en su totalidad la presencia de ARN. La RNasa se utiliza a una concentración de 100mg/ml. 4)Extracción de proteínas.-la eliminación de las proteínas de la muestra se termina utilizando solventes organicos como el fenol que es utilizado en la extracción de las proteínas debe ser biodestilado o ultrapuro. 5) Precipitación del DNA.- para poder concentrar el DNA después de la eliminación de las proteínas, se utilizan una serie de sales entre las que se encuentran el acetato de sodio, acetato depotasio, acetato de amonio y cloruro de litio. Una vez que el DNA ha estado en contacto con los cationes seleccionados se precipitan con volúmenes de etanol absoluto.

   

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Extracción del DNA A partir de células sanguíneas o de espermatozoides (Nature, Vol 318, 12 dic, 1985) 1.- Tomar 300 µl de glóbulos blancos principalmente. 2.- La solución grinding contiene las siguientes soluciones...