geometria y trigonometria en las construcciones de nuestro entorno
Páginas: 8 (1798 palabras)
Publicado: 19 de febrero de 2015
PRÁCTICA 1
Separación de aminoácidos por técnicas de cromatografía de capa fina. Reacciones coloreadas de
aminoácidos: prueba de ninhidrina.
Introducción.
Con la siguiente práctica conseguimos conocer los aminoácidos de una muestra problema y su identificación
gracias a la reacción coloreada con ninhidrina.
Tenemos una serie de muestras patrón con diferentes aminoácidos.
La cromatografíaes una técnica que permite la separación y purificación de mezclas complejas en las
biomoléculas que la componen.
Reactivas.
−Glutamato, glicina, lisina, prolina y leucina al 1% en n−propanol al 10% en agua destilada.
−Solución problema de aminoácidos.
−Eluyente: etanol: hidróxido amónico al 34% en una proporción 7:3.
Resultados y discusión.
1. Separación de aminoácidos por cromatografía encapa fina sobre gel de sílice.
Una vez revelada la placa hay que medir la distancia que separa el frente de avance de la línea de aplicación
de los patrones y de la muestra problema, a lo que denominamos Df (12,7).
Después calculamos la Rf de cada uno de los aminoácidos de la siguiente forma: Rf=D/Df siendo D la
distancia recorrida por cada muestra y Df la distancia del frente de avance.MUESTRA
D(cm)
Rf
Lisina
0.5
0.03
Glicina
Glutamato
03.5
12
0.27
0.94
Prolina
4
0.31
Leucina
9
0.70
Al variar Rf según los distintos aminoácidos, nos permite distinguir más fácilmente los aminoácidos que
constituyen el problema. Esta variación se produce debido a que las fuerzas de avance ejercidas por la fase
móvil en su desplazamiento sobre laestacionaria son diferentes. Hay que tener en cuenta la absorción del
material utilizado.
1
Los compuestos más solubles seguirán el camino del eluyente con más velocidad lo que nos permite de
terminar las distintas alturas alcanzadas por las manchas de los diferentes patrones.
2. Identificación de los aminoácidos que componen la molécula.
Ya revelada la muestra observamos que tiene dosmanchas, debido a que la muestra se compone de dos
aminoácidos. Observando la similitud que guarda la muestra problema con los patrones, determinamos los
aminoácidos que componen la muestra (glutamato y leucina)
PRACTICA 2
Reacciones coloreadas para la determinación cualitativa de azúcares. Prueba de la antrona y fehling.
Introducción.
La prueba de la antrona se basa en determinar la naturaleza deun azúcar problema mediante esta sustancia.
Llegaremos a una conclusión contrastando el problema con los patrones.
La prueba del fehling se basa en determinar si el azúcar posee poder reductor ya que los azúcares reductores
tienen una coloración rojiza debido al oxido cuproso que es forma por oxidación del azúcar por medio del
catión Cu 2+.
Los azúcares utilizados son la glucosa, fructosa,xilosa y sacarosa.
Resultados.
1. Prueba de fehling.
Ponemos en tubos de ensayo 2 ml de solución de azúcares y solución problema. El blanco se obtiene con 2 ml
de agua destilada. Después se añaden 5 gotas de fehling a los tubos. Una vez agitados se sitúan al baño maría
observando los cambios de color de cada compuesto. Si hay cambio de color el azúcar es reductor (maltesa), y
si no, no esreductor (sacarosa).
5 min.
BLANCO
SACAROSA
GLUCOSA
XILOSA FRUCTOSA
PROBLEMA
azul
azul
Azul
Azul
amari.
azul
azul claro
azul claro
Naranja claro
Naranja
oscuro
naranja claro
azul claro
"
"
"
"
"
"
1 min.
100*C
5 min.
De esta tabla se deduce que los azúcares reductores son la glucosa, la xilosa y la fructosa, dado quecambian
de color.
2. Prueba de la antrona.
2
Preparamos el blanco con dos gotas de agua destilada y 2 ml de antrona, 4 tubos con las muestras patrón con
una gota de cada azúcar y 2 ml de antrona, y otro tubo con una gota de la muestra problema y 2 ml de antrona,
poniéndolos a continuación al baño maría.
Se obtuvieron los siguientes resultados:
5 min.
BLANCO
SACAROSA
GLUCOSA...
Separación de aminoácidos por técnicas de cromatografía de capa fina. Reacciones coloreadas de
aminoácidos: prueba de ninhidrina.
Introducción.
Con la siguiente práctica conseguimos conocer los aminoácidos de una muestra problema y su identificación
gracias a la reacción coloreada con ninhidrina.
Tenemos una serie de muestras patrón con diferentes aminoácidos.
La cromatografíaes una técnica que permite la separación y purificación de mezclas complejas en las
biomoléculas que la componen.
Reactivas.
−Glutamato, glicina, lisina, prolina y leucina al 1% en n−propanol al 10% en agua destilada.
−Solución problema de aminoácidos.
−Eluyente: etanol: hidróxido amónico al 34% en una proporción 7:3.
Resultados y discusión.
1. Separación de aminoácidos por cromatografía encapa fina sobre gel de sílice.
Una vez revelada la placa hay que medir la distancia que separa el frente de avance de la línea de aplicación
de los patrones y de la muestra problema, a lo que denominamos Df (12,7).
Después calculamos la Rf de cada uno de los aminoácidos de la siguiente forma: Rf=D/Df siendo D la
distancia recorrida por cada muestra y Df la distancia del frente de avance.MUESTRA
D(cm)
Rf
Lisina
0.5
0.03
Glicina
Glutamato
03.5
12
0.27
0.94
Prolina
4
0.31
Leucina
9
0.70
Al variar Rf según los distintos aminoácidos, nos permite distinguir más fácilmente los aminoácidos que
constituyen el problema. Esta variación se produce debido a que las fuerzas de avance ejercidas por la fase
móvil en su desplazamiento sobre laestacionaria son diferentes. Hay que tener en cuenta la absorción del
material utilizado.
1
Los compuestos más solubles seguirán el camino del eluyente con más velocidad lo que nos permite de
terminar las distintas alturas alcanzadas por las manchas de los diferentes patrones.
2. Identificación de los aminoácidos que componen la molécula.
Ya revelada la muestra observamos que tiene dosmanchas, debido a que la muestra se compone de dos
aminoácidos. Observando la similitud que guarda la muestra problema con los patrones, determinamos los
aminoácidos que componen la muestra (glutamato y leucina)
PRACTICA 2
Reacciones coloreadas para la determinación cualitativa de azúcares. Prueba de la antrona y fehling.
Introducción.
La prueba de la antrona se basa en determinar la naturaleza deun azúcar problema mediante esta sustancia.
Llegaremos a una conclusión contrastando el problema con los patrones.
La prueba del fehling se basa en determinar si el azúcar posee poder reductor ya que los azúcares reductores
tienen una coloración rojiza debido al oxido cuproso que es forma por oxidación del azúcar por medio del
catión Cu 2+.
Los azúcares utilizados son la glucosa, fructosa,xilosa y sacarosa.
Resultados.
1. Prueba de fehling.
Ponemos en tubos de ensayo 2 ml de solución de azúcares y solución problema. El blanco se obtiene con 2 ml
de agua destilada. Después se añaden 5 gotas de fehling a los tubos. Una vez agitados se sitúan al baño maría
observando los cambios de color de cada compuesto. Si hay cambio de color el azúcar es reductor (maltesa), y
si no, no esreductor (sacarosa).
5 min.
BLANCO
SACAROSA
GLUCOSA
XILOSA FRUCTOSA
PROBLEMA
azul
azul
Azul
Azul
amari.
azul
azul claro
azul claro
Naranja claro
Naranja
oscuro
naranja claro
azul claro
"
"
"
"
"
"
1 min.
100*C
5 min.
De esta tabla se deduce que los azúcares reductores son la glucosa, la xilosa y la fructosa, dado quecambian
de color.
2. Prueba de la antrona.
2
Preparamos el blanco con dos gotas de agua destilada y 2 ml de antrona, 4 tubos con las muestras patrón con
una gota de cada azúcar y 2 ml de antrona, y otro tubo con una gota de la muestra problema y 2 ml de antrona,
poniéndolos a continuación al baño maría.
Se obtuvieron los siguientes resultados:
5 min.
BLANCO
SACAROSA
GLUCOSA...
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