Green Flourescent Protein





INTRODUCCION
Mientras más oscuro sea el entorno, más intensa será la luz que emite, esto fue lo que observaron Osamu Shimomura y sus colaboradores cuando trabajando en la Universidad de Princeton en el laboratorio de Frank Johnson estudiaban las propiedades bioluminiscentes de la medusa Aequorea victoria, la pregunta que se hacían era por qué esta medusa podía emitir una característica luzverde. Tiempo más tarde, y luego de la recolección de miles de medusas, lograron identificar una fotoproteína a la que denominaron Aequorina, que al ser activada con Ca emitía una luz azul. Observaron después que la luz de la medusa adquiría un tono verdoso bajo la luz ultravioleta, y que esta coloración se debía a otra proteína, a la que llamaron “proteína verde fluorescente” (Green FluorescentProtein, o GFP) estas dos proteínas trabajan juntas en los órganos de la medusa para convertir las señales luminiscentes inducidas por Ca2+ en la luminiscencia verde característica de esta especie.
La función de la GFP es capaz de la convertir la luz azul emitida por la aequorina en luz verde, y con esto aumenta tanto la producción de luz por la misma aequorina y la transmisión de luz en elocéano. La medusa Aequorea victoria es generalmente translúcida, pero frecuentemente está decorada con estructuras brillantes, ya que la GFP emite bioluminiscencia en la zona verde del espectro visible.
La GFP es una proteína compuesta por 238 aminoácidos con una masa molecular de 27kDa, presenta fluorescencia de color verde brillante cuando es expuesta a la luz azul. Aunque muchos otros organismosmarinos tienen proteínas similares, la GFP se refiere tradicionalmente a la primera proteína aislada de la medusa Aequorea victoria. 
El fluoróforo, que es la parte química excitable que la hace fluorescente, se forma a partir de una secuencia muy específica de aminoácidos. Lo único que se necesita para que esto ocurra es oxígeno molecular por medio de la ingeniería de proteínas, los científicoslograron producir una gran cantidad de proteínas mutantes tipo GFP con propiedades mejoradas, de manera que pudieron ampliar la gama de colores de la proteína y producir variantes más estables e intensas en tonos como amarillo, violeta o azul, esta contribución fue muy importante ya que cuando se realiza un estudio a un conjunto de proteínas, estas se pueden marcar de distintos colores paraidentificarlas.
Es la única de las proteínas que emiten luz, y que tampoco requiere de la presencia de cofactores o sustratos para generar esa luz verde.
 Las proteínas fluorescentes son muy versátiles y se utilizan en diversos campos como la microbiología, ingeniería genética, fisiología, e ingeniería ambiental, se ha convertido así en una herramienta invaluable en muchas ramas de la investigación biológica.Quizá lo más importante es que por primera vez se pueden estudiar a fondo las células vivas y los organismos.




HISTORIA

Descubrimiento y aislamiento
La historia del descubrimiento se remonta a Japón, tras la II Guerra Mundial. En 1955, Osamu Shimomura fue contratado como ayudante en la Universidad de Nagoya y se le encomendó la tarea de describir qué compuesto hacia que los restos trituradosde un molusco brillaran al contacto con el agua, el fenómeno de bioluminiscencia, las reacciones químicas dentro de organismos vivos que producen luz.
Años más tarde, en EE.UU, estudiando la medusa Aequorea victoria identificó los órganos de luz que eran responsables de la fluorescencia azul que emitía, y junto a Frank Johnson, de la Universidad de Washington, aisló una proteína bioluminiscentedependiente del calcio, a la que llamaron aequorina, nombre derivado de la medusa con la que trabajaban. Esta proteína emite fluorescencia en la zona azul del espectro, pero en la medusa emitía luz verde, profundizando estos estudios, Shimomura descubrió que la luz azul emitida por aequorina era absorbida por una segunda proteína (más tarde llamada proteína verde fluorescente o GFP), la que a su...