guia de laboratorio bacteriologia

GUIA LABORARORIO MICROBIOGÍA

Titulo del Laboratorio: Tinción de Gram ,técnicas de siembra


Nombre de la carrera: Medicina

Nivel del curso: VI Nivel

Nombre de los docentes responsables: TM María Ester Aliaga López
TM Lina Castillo CatalánFecha de ejecución: 14-15 abril 2011


1.- Objetivo del laboratorio

2.- Introducción

3.- Desarrollo de la actividad

4.- Tipo de evaluación_

4.1.- Quíz de entrada:
Objetivo: El alumno este informado de la teoría para realizar la actividad.

4.2.- Informe de la actividad realizada a entregaren el laboratorio siguiente
Objetivo: Evaluar aprendizaje del laboratorio realizado






1.- Objetivo del laboratorio:

1.1.-El alumno debe aprender los fundamentos de la coloración de Gram y su aplicación.
1.2.-Debe manejar diferentes técnicas de siembra, para lograr aislamiento de los microorganismos.


2.- Introducción:

Fundamento de la tinción de Gram.*Clasificación de bacterias según el tipo de pared celular:

-Gram positivas
-Gram negativas
-Acido-Alcohol resistentes
-Otras (ej: arqueobacterias)
-Sin pared (Micoplasmas: parásitos intracelulares)

*Componentes de la pared celular:
. Peptidoglicanos
. Proteínas
. Polisacáridos
. Lipopolisacaridos(solo en bacterias Gram negativas)
. Ac. Teicoicos y ác. Lipoteicoicos (solo en bacterias Grampositivas)

Sin embrago los componentes tipicos de la pared celular son los peptidoglicanos, los lipopolisacaridos y los ác. Teicoicos y ác. Lipoteicoicos.

*-Gram positivas
Pared celular formada casi exclusivamente por unidades repetidas compuestas de peptidoglicanos y atravesada por ác teicoicos y lipoteicoicos.
Al teñirlas con la tinción de Gram se tiñen de azul
*-Gram negativas
Paredcelular mas compleja, formada por una capa fina de peptidoglicanos sobre la membrana citoplasmática que esta situada en un espacio virtual que es el Espacio Periplasma(#), y sobre este espacio existe una especie de segunda membrana plasmática que es la Membrana Externa* de la pared celular bacteriana, la cual es exclusiva de las bacterias Gram negativas.
Al hacer la tinción de Gram adquieren uncolor rojo
Las bacterias se agrupan en base a su tinción por la técnica de Gram.
– Gram positivos - Pared celular con grueso peptidoglicano que retiene un colorante específico. No tienen membrana externa.
– Gram negativos - pared celular compleja, con membrana externa y un espacio entre membrana interna y externa -el periplasma- que contiene el saco de mureína y abundantes enzimas. Elpeptidoglicano es fino, por lo que no retienen el colorante.

Con esta tinción, las Gram positivas aparecen en color púrpura, mientras que las Gram negativas presentan color rojo















Cocacea Gram +(Estafilococcus) Bacilo Gram (-) E. coli


Tecnicas de siembra

*Introduccion:

Un microorganismo se puede sembrar en un medio líquido o en la superficie de unmedio sólido de agar. Los medios de cultivo contienen distintos nutrientes que van, desde azúcares simples hasta sustancias complejas como la sangre o el extracto de caldo de carne. Para aislar o purificar una especie bacteriana a partir de una muestra formada por muchos tipos de bacterias, se siembra en un medio de cultivo sólido donde las células que se multiplican no cambian de localización; trasmuchos ciclos reproductivos, cada bacteria individual genera por escisión binaria una colonia macroscópica compuesta por decenas de millones de células similares a la original. Si esta colonia individual se siembra a su vez en un nuevo medio crecerá como cultivo puro de un solo tipo de bacteria.
La principal diferencia entre un medio de cultivo sólido y uno líquido es que el medio de cultivo...