Guia TPMicro I 2015 corregido

Facultad de Ciencias Exactas y
Naturales
Guia de TP- Microbiología I

UNIVERSIDAD DE BELGRANO
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES

MICROBIOLOGIA I
GUIA DE TRABAJOS PRACTICOS DE LABORATORIO
2015

AUTORES
Dr. GUSTAVO FABIÁN SALDAÑA
Dra. MONICA B. WACHSMAN
Dra. MARÍA CLAUDIA DEGROSSI

MICROBIOLOGÍA I - 2015

TRABAJOS PRÁCTICOS
TPN 1: MEDIO AMBIENTE- TOMA DE MUESTRAS DEL AMBIENTE
TPN 2: TINCIÓNDE GRAM- TINCIÓN ÁCIDO RESISTENTES
TPN 3: TINCIÓN DE ESPORAS-TINCION DE CÀPSULAS
TPN 4: MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS Y QUÍMICOS
TPN 5: PREPARACIÓN Y ESTERILIZACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO- CONTROLES
TPN 6: PRUEBAS DE DIFERENCIACIÓN BIOQUÍMICAS
TPN 7 y 8: CULTIVO DE BACTERIAS ANAERÓBIAS
TPN 9 y 10: MEDIOS DE CULTIVO SÓLIDOS- MÉTODO ECOMÉTRICO
TPN 11: CINÉTICA DEL CRECIMIENTO BACTERIANO-E. coli2

MICROBIOLOGÍA I - 2015

TRABAJO PRACTICO Nº1
OBSERVACION Y CLASIFICACION DE COLONIAS. DETECCION DE MICROORGANISMOS DEL
MEDIO AMBIENTE
INTRODUCCIÓN
La evaluación de la calidad microbiológica del ambiente nos indica la cantidad de
microorganismos que están presentes en un área determinada. Mientras más limpia es un área,
menor será el número de microorganismos presentes en el aire de la misma.Los
microorganismos generalmente no están flotando en el aire sino que se encuentran sobre
partículas inertes, por ejemplo polvo, gotas de agua, etc. que le sirven como medio de
transporte, y pueden encontrarse aislados o agregados. Algunas de estas partículas pueden
depositarse sobre las superficies.
Las personas también son una fuente de contaminación, ya que liberan gran cantidad de
partículasal moverse, toser, estornudar, por exfoliación de la piel, etc. Algunas de estas
partículas llevan microorganismos que podrían contaminar el material con el que estamos
trabajando.
Por lo anteriormente expuesto es necesario determinar la calidad microbiológica del aire, las
superficies y el personal.
CONTROL MICROBIOLÓGICO DEL AIRE
Existen diferentes métodos que permiten evaluar la calidadmicrobiológica del aire.
Uno de los más utilizados es el método de sedimentación en placas de agar, que consiste en
exponer placas con un medio nutritivo sólido al ambiente durante un periodo determinado,
incubar las placas y hacer el recuento de las colonias obtenidas.
El tiempo de exposición depende del ambiente a evaluar, mientras mayor sea la contaminación
menor será el tiempo de exposición de lasmismas. Normalmente se utilizan placas de 9 cm de
diámetro.
Con este método se detectan los microorganismos que caen sobre la superficie de la placa, lo
cual simula lo que ocurre normalmente cuando estamos trabajando en el laboratorio.
Como las condiciones ambientales influyen en la sedimentación de los microorganismos es
necesario que, cuando se realiza este método, las placas se expongan siempre enel mismo
lugar y bajo las mismas condiciones para poder comparar los resultados obtenidos.
CONTROL MICROBIOLÓGICO DE SUPERFICIES
El control microbiológico de superficie nos proporciona información sobre la cantidad de
microorganismos presentes sobre una superficie, la cual puede ser un equipo, mesón, ropa,
manos del personal, etc.
Esta evaluación generalmente se hace utilizando:
- Placas decontacto (RODAC) (Replicate Organism Direct Agar Contact): son placas de 55-60
mm de diámetro llenas con medio de cultivo hasta obtener una superficie convexa, que
sobresale del borde de la placa. Estas placas pueden preparase en el laboratorio o adquirirse
comercialmente. Generalmente se utilizan para determinar la calidad microbiológica de
superficies planas. Para tomar la muestra se abre la placa yse presiona sobre la superficie a
ensayar, sin deslizarla. Se tapa la placa y se incuba bajo las condiciones adecuadas. Se cuenta el
número de colonias y se calcula el número de ufc/área de la placa, la cual está entre 24 y 30
cm2, dependiendo del diámetro de la misma.

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- Método del Hisopo: Se recomienda para tomar muestras de superficies irregulares donde no
se pueden...