Hidrólisis de una proteína y ensayos para una proteína y aminoácidos

 “HIDRÓLISIS DE UN PROTEÍNA Y ENSAYOS PARA PROTEÍNAS Y AMINOÁCIDOS”
PRACTICA Nº 12

OBJETIVOS
1. Efectuar la hidrolisis total de una proteína.
2. Aprender a realizar algunos análisis para la identificación de aminoácidos.

3. Identificar algunos aminoácidos presentes en un hidrolizado de proteína, por medio de sus propiedades físico-químicas.
4. Identificar por cromatografía en placafina algunos de los aminoácidos presentes en un hidrolizado de proteína.
INTRODUCCIÓN
Las proteínas son polipéptidos naturales de elevado peso molecular. Se encuentran en todas las partes de los organismos vivos y constituyen la clase de compuestos biológicamente importantes de mayor diversidad.
Los aminoácidos son las unidades constituyentes de las proteínas, son de interés en las organizacionesestructurales y funcionales de células y tejidos
Clasificación:
Simples: Las proteínas simples constan sólo de aminoácidos o de sus derivados. Estas proteínas se pueden clasificar en dos categorías según su forma.
Proteínas fibrosas: Son como hebras, ya sean solas o en grupos, generalmente poseen estructura secundaria y son insolubles en agua.
Proteínas globulares: Las proteínas globulares sedividen en seis categorías y, en general, estos son casi redondeada en su contorno, con la estructura terciaria o cuaternaria y en su mayoría soluble.
Se subdividen en:
Albúminas
Globulinas
Glutelinas
Prolaminas
Albumunoides
Histonas
Protaminas



Conjugadas: Las proteínas conjugadas consisten en proteínas simples combinadas con algún componente no proteico. Los grupos no proteicosse llaman grupos prostéticos. Las proteínas conjugadas se incluyen el siguiente grupo:
Nucleoproteínas (proteínas + ácidos nucleicos)
Lipoproteínas (proteínas + lípidos)
Glicoproteínas (proteínas + hidratos de carbono)
Cromoproteínas (proteínas + pigmentos)
Metaloproteínas son complejos de proteinas con elementos metálicos (Zn, Mn, Cu, Fe) como el Fe de la ferritina.
Mucoproteínas(proteínas + muoild)
Fosfoproteínas (proteína + fosfato)
Clasificación por su estructura

1. Primaria: Estructura lineal que consiste en una secuencia de aminoácidos y componentes prostéticos con los que está constituida.
2. Secundaria: La organización de la cadena se le denomina hélice y se observa que cada grupo amida está unido por puente de hidrógeno a otra amida.
3. Terciaria: Existeinteracción de unas partes de la proteína con otras por medio de las cadenas laterales de los aminoácidos.
4. Cuaternaria: Describe cómo muchas subunidades, que no siempre son idénticas, se reúnen para formar complejos más grandes.

Identificación de estructura
La determinación de la estructura de una proteína, es un proceso complejo que comprende el empleo de métodos instrumentales y químicos.
Lahidrólisis de proteínas por los diferentes métodos (ácida, básica o enzimática) proporciona 20 aminoácidos (alanina, prolina, lisina, ácido aspártico, ácido glutámico, asparagina, glutamina, histidina, glicina, serina, valina, tirosina, triptófano, fenilalanina, treonina, isoleucina, leucina, cisteína, metionina y arginina) como constituyentes universales de las proteínas.
Dependiendo del tipo deaminoácidos que contenga una proteína se pueden realizar diferentes análisis:
1. Reacción de la ninhidrina
2. Reacción de Biuret
3. Reacción Xantoprotéica
4. Reacción de Millón
5. Reacción de Sakaguchi





Discusión de resultados

1) Reacción Xantoprotéica

Con esta reacción podemos identificar la presencia de los aminoácidos aromáticos (tirosina, triptófano).
La reacción sebasa en la nitración del anillo bencénico con ácido nítrico, produciendo derivados del nitrobenceno de color amarillo. Estos derivados amarillos se tornan anaranjados a la alcalinidad de la solución con NH4OH o NaOH.




Sustrato
Observaciones


Solución “A” (grenetina hidrolizada)

La prueba arrojó un resultado positivo mostrando una coloración amarilla al ser agregado el ácido...