IDENTIFICACION BACT

IDENTIFICACION
BACTERIANA

Dra. Dennice Morales Deza

Conjunto de técnicas y procedimientos que
se aplican para establecer la identidad de
un microorganismo.

Los métodos más utilizados se clasifican en:
1. Métodos basados en criterios morfológicos
2. Métodos basados en tinción diferencial
3. Métodos basados en pruebas bioquímicas
4. Métodos basados en tipificación con fagos
5. Métodos basadosen pruebas serológicas
6. Métodos basados en detección molecular

IDENTIFICACION
BACTERIANA
• En la mayoría de los casos la identificación
se realiza con la combinación de más de
uno.
• Ejemplo:
Ejemplo identificación de bacterias con base
a criterios morfológicos, tinción diferencial,
pruebas bioquímicas y serológicas.

MORFOLOGIA BACTERIANA

Dra. Dennice Morales Deza

Apariencia
• Existencientos de especies de
bacterias, pero todas ellas tienen una
de las tres formas existentes:
• Algunas son bastones y se llaman bacilos.
• Otras tienen forma de esferas pequeñas y se
llaman cocos.
• Otras son helicoidales o espirales.

Bastones

Epulopiscium

Escherichia coli

Cocos

Estreptococos

Espirales

Espiroqueta

Borrelia

ALGUNAS ESPECIES

TINCIONNES BACTERIANAS

Dra. Dennice MoralesDeza

Gram positivas y gram negativas
Grampositiva

Gramnegativa

• La diferencia de composición
bioquímica de las paredes de
dos grupos de bacterias es
responsable de su diferente
comportamiento frente a un
colorante formado por violeta
de genciana y una solución
yodurada (coloración Gram).
• Se distinguen las bacterias
grampositivas (que tienen el
Gram después de lavarlas
con alcohol) y lasgramnegativas (que pierden
su coloración).

BIOQUIMICA BACTERIANA

Dra. Dennice Morales Deza

Estas pruebas se fundamentan en demostrar:
• Es capaz de fermentar azúcares
• La presencia de enzimas /degradación de
compuestos
• Producción de compuestos coloreados, etc
Aun bacterias fuertemente relacionadas
pueden separarse en dos especies diferentes
con base a pruebas bioquímicas.

PRUEBASBIOQUIMICAS:
• Procesos respiratorios que utilizan las bacterias
para la obtención de energía
• Pruebas basadas en el metabolismo glucídico
• Pruebas basadas en el metabolismo protéico
• Pruebas basadas en el metabolismo lipídico
• Pruebas basadas en caracteres de resistencia
a ciertas sustancias
• Investigación de sustancias energéticas
nutritivas

PRUEBAS BIOQUIMICAS:
PROCESOS RESPIRATORIOS QUEUTILIZAN LAS
BACTERIAS PARA LAOBTENCIÓN DE ENERGÍA

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Prueba de Catalasa
Prueba de Oxidasa
Prueba de óxido-fermentación
prueba de la reducción de nitratos
Test de Braum o prueba del cianuro potásico
prueba de los caldos fecales ( fk y sf

Prueba de catalasa:
• Se utiliza para comprobar la presencia del
enzima catalasa que se encuentra el la
mayoría de las bacterias aerobias y
anaerobiasfacultativas que contienen
citocromo. La principal excepción es
Streptococcus.

Prueba de catalasa:
Método del portaobjetos (recomendado):
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•
•
•

Con el asa de siembra recoger el centro de una colonia
pura de 18-24 horas y colocar sobre un portaobjetos
limpio de vidrio.
Agregar con gotero o pipeta Pasteur una gota de H2O2 al
30% sobre el microorganismo sin mezclarlo con el cultivo.
Observar laformación inmediata de burbujas (resultado
positivo).
Desechar el portaobjetos en un recipiente con
desinfectante.
Si se invierte el orden del método (extender la colonia
sobre el agua oxigenada) pueden producirse falsos
positivos.

Prueba de oxidasa:
Básicamente es la detección de la enzima
oxidasa, muy útil en la identificación de
bacterias Gram (-).
• La reacción de la oxidasa se debe a lapresencia del sistema de citocromooxidasa.
• Citocromo-oxidasa, oxida al dimetilparafenilen-diamina (reactivo incoloro)
dando un producto de color.

• El sistema de citocromos está generalmente
presente en organismos aeróbicos.
METODO:
Utilizando un tubo capilar con tetrametil-pphenylendiamina al 1%, se adiciona una pequeña
cantidad a un cultivo bacteriano colocado sobre un
papel filtro y...