Identificacion de celulas sanguineas

Introducción

Las tinciones hematológicas son un conjunto de procesos que conducen a la coloración de las estructuras que componen las células sanguíneas. Esto tiene por objeto el aumentar el contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea, y permite por tanto que las células sean visual izadas microscópicamente con mayor facilidad.
Tradicionalmente, las tinciones se han logradomediante el uso de colorantes que con frecuencia derivan de la anilina (tinciones tradicionales o clásicas). Estos colorantes se reúnen en 4 grupos:
Tinciones cito químicas: Demuestran la presencia, más o menos abundante, o la ausencia de determinadas sustancias, localizadas en el interior de los gránulos citoplasmáticos de los leucocitos.













Objetivo

Diferenciar célulassanguíneas del frotis realizado.
Realizar las tinciones hematológicas corrientes



















Material
Jeringa

Ligadura

Algodón

Tubo de Ensayo

Porta Objetos

Reactivos
Solución Fijadora: (Fast Green en Metanol)
Solución Colorante I: (Eosina G en tampón Fosfato)
Solución Colorante II: (Tiazina en tampón fosfato)

AguaProcedimiento

Colocar el torniquete en el brazo. Para producir la ingurgitación de la vena.

Seleccionar el vaso mediante el tacto. También se la puede localizar por inspección.

Desinfectar el punto de punción con torundas humedecidas con alcohol.

Pinchar la piel y posteriormente la vena en dirección contraria al flujo sanguíneo. Con un ángulo de 15º respecto al brazo. Con el bisel de la agujahacia arriba.

Una vez recogida la muestra, sacar despacio, de manera de no hacerle doler al paciente.

Colocar la torunda en el área de punción.

Retirar el torniquete.

La muestra recolectada colocar en el tubo de ensayo.

Retirar el material usado.

Deposita una gota de sangre en un extremo del porta.

Para realizar el frotis (extensión) se procede como indica el dibujo:

A.Deposita una pequeña gota de sangre en un extremo del portaobjetos. Si la cantidad de sangre es excesiva las células quedarán apelotonadas en la extensión y Será difícil observarlas. Coloca el segundo portaobjetos formando un ángulo de unos 45° con el primero y asegurándote de que Apoya todo el borde. Desliza lentamente el portaobjetos hacia la gota de sangre hasta que entren en contacto. Veráscomo la sangre se extiende por el borde.
B. Desliza ahora el porta en el sentido contrario en un movimiento rápido y procurando que no pierda el contacto con el otro.
C. Todo el procedimiento se debe realizar apoyado en la mesa y sujetando el porta como indica el dibujo.
D. Deja secar el frotis al aire antes de comenzar el proceso de tinción.

Debes Esperar un tiempo determinado para que lamuestra este seca

Sumergir el frotis en la solución fijadora 5 veces durante 1 segundo cada vez, dejar escurrir el exceso.

Sumergir el frotis en el Hemocolorante I, 5 veces durante 1 segundo cada vez, dejar escurrir el exceso.

Sumergir el frotis en el Hemocolorante II, 5 veces durante 1 segundo cada vez, dejar escurrir el exceso.

Por último debe lavarse el exceso de colorante conabundante agua. El chorro de agua no debe ser fuerte, para evitar que arrastre las células sanguíneas. La mejor manera es colocar la porta inclinada y dejar caer un pequeño chorro de agua sobre el extremo superior.

Observar en el microscopio y diferenciar las células sanguíneas.

Lo que se explica anteriormente es todo lo teórico de cómo lo debemos de hacer y posteriormente se muestra como seguimosel procedimiento y lo pusimos en práctica.




Aquí es como se muestra cuando ya extrajimos la sangre del paciente y colocamos anticoagulante, para que la sangre no se coagule y la podamos usar para poder hacer el frotis.









Aquí muestra cuando estamos agarrando la sangre con la pipeta para poder tener la cantidad adecuada en el porta objetos para hacer el frotis correcto....