Informe 1 Tincion De Gram

Universidad Bernardo O’higgins
Departamento de Ciencias Químicas y Biológicas
Microparasitología




Informe de Laboratorio n° 1
TINCIÓN DE GRAM











Nombre: María Jesús Arenas
Yennifer Fuller
Profesor: Carolina Farah
Fecha: 03/09/2015

Introducción

La tinción Gram es una tinción diferencial que la desarrollo por primera vez Danés Hans Christian Gram enel año 1884.
La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio bacteriológico porque veremos cómo se trabaja y cuál es su función, ya que la tinción gram permite diferenciar los dos grandes tipos de bacterias: Gram (+) y Gram (-), las bacterias Gram (+) tienen una gruesa capa de peptidoglicano en su pared celular, mientras que las bacterias Gram (-) tienen unapared celular de peptidoglicano más fina.
En este laboratorio usaremos instrumentos para poder identificar los distintos procedimientos efectuados como por ejemplo colorante cristal violeta, etanol, safranina, placa, pinchas, microscopio, mechero.
La tinción gram también es de gran utilidad por que se usa en laboratorios para diagnósticos clínicos de enfermedades por bacterias.



Objetivo
Elprincipal objetivo en este laboratorio es ver en bacterias y Staphylococcus aureus el cambio celular que producen al colocarle cada colorante e identificar si son Gram positivas (+) o Gram negativas (-).









Procedimiento experimental

1- Se eligió la placa con la colonia del agar de la muestra staphilococus aeurus, luego se desinfecto la superficie donde se tomara la muestra.
2- Seencendió el mechero Bunsen, luego se tomó el asa, se esterilizo con el mechero y luego se enfrió un poco en el agar (para evitar quemar la colonia bacteriana).
3- Después de enfriar el asa se tomó una pequeña porción bacteriana staphylococus aureus y se dejó en un portaobjeto.
4- Después de aplicar la muestra en el portaobjeto, se aplicó también una gota de agua destilada y se homogenizo la muestra(se mezcla la muestra con el agua destilada para esparcir la colonia bacteriana en el portaobjeto). Luego se tomó la muestra con las pinzas de madera, se llevó al lava manos del laboratorio, se aplicó el primer colorante llamado cristal violeta sobre la muestra a estudiar.
5- Se dejó actuar por 1 minuto, luego la muestra se lavó con agua destilada.
6- Y se aplicó la segunda sustancia llamadalugol, luego también se dejó actuar por 1 minuto, luego se lavó con agua destilada.
7- y posteriormente se aplicó la tercera sustancia ,un agente decolorante llamado alcohol acetona ,este también se dejó actuar por 1 minuto , luego también se lavó con agua del chorro de la llave
8- y se aplicó la cuarta sustancia y última solución colorante de contraste llamado safranina la cual se dejó actuar unminuto y también se lavó con agua
9- Terminada esta etapa se llevó hacia el mechero, donde se dejó secar con el calor producido por el mechero, y por último se llevó la muestra lista al microscopio para ser observada, en el microscopio se le aplicó una gota de aceite de inmersión y se observó a un aumento de 100x.




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ResultadosMuestra N°1:
Placa de Petri con contenido cremoso color beige.
¿A qué microorganismo pertenece?
• Staphylococcus Aureus (estafilococo Aureus)
¿Es Gram positivo o negativo?
• Es un microrganismo Gram positivo
¿Observo algún tipo de agrupación bacteriana?
• No se observó agrupaciones bacterianas.
Observaciones muestra N°1
En el primer procedimiento sé tomó demasiada muestra y eso provoco que en elmicroscopio se viera una muestra difusa teñida de un color purpura lo que nos indicó que las células eran Gram Positivas, no se consiguió distinguir morfología ni agrupaciones. (fig.1)

Figura 1. Tinción de Gram muestra 1. Fotografía tomada en un microscopio óptico con un aumento de 40x.





Observaciones muestra 2:
Después de realizar la tinción de Gram en la muestra número 2, procurando...