Informe Laboratorio N 2 CQU 310 2015 02 CROMATROGRAFIA DE EXCLUSION


PRACTICONº2
INFORME DELABORATORIODEBIOQUIMICA CQU-310

Puntaje: 60pts / 60 pts

Nombre Alumnos
Claudia Tabilo, Ivonne Pincheira,
Luis Vergara, Mauricio Soto

Fecha
07 de Octubre de 2015
Curso
CQU310 -
Grupo A

I.-TITULO(1pto)






II.-OBJETIVOS(2 pts)












III.-CÁLCULOSYRESULTADOS:

a.-Datos teóricos:(2 pts)








b.-Cálculos.(NoolvidarUnidades).(5 pts)












c.-Tabla deelusión de compuesto (Indique con colores diferentes los volúmenes de elusión de la hemoglobina como el DCPIP).(5 pts)




λ= 420 nm λ=580 nm
Tubo
Volumen de Tampón (ml)
Absorbancia (Hemoglobina)Absorbancia (DCPIP)
1
5

-0,020
0,021
2
10

0.038
0,021
3
15
0,174
0,021
4
20
2,023
0,119
5
25
0,538
0,231
6
30
0,027
0,021
7
35
-0,023
+0,021
8
40
-0,038
+0,021
9
45
-0,024
+0,021
10
50
-0,003
+0,02111
55
-0,028
+0,021
12
60
-0,040
+0,021
13
65
0,023
+0,021

14
70
-0,020
+0,021
15
75
0,026
+0,021
16
80
-0,046
+0,021
17
85
-0,023
+0,021
18
90
-0,036
+0,021
19
95
-0,003
+0,021
20
100
-0,021
+0,021Volumen de elusión = altura máxima del peak.














d.- Cromatrograma . No olvidar colocar título del gráfico y ejes(5 pts)



Figura 1. Cromatograma de exclusión


e-Cálculo de Kav (Noolvidar unidades) (10pts)






















IV.-ANÁLISIS:

a) Discusión de Resultados(20 pts)














b) Preguntas(10 pto)







¿En qué casos se puede usar la cromatografía de exclusión?Podemos utilizarla:
Para la purificación de proteínas
Se puede establecer una correlación entre el tamaño molecular y la movilidad de la columna de exclusión, por lo que esta técnica se emplea paradeterminar masas moleculares.
Para eliminar sustancias de pequeño tamaño molecular de una muestra proteica, el resultado es similar a una diálisis.


¿Qué información entrega el Kav? Explique.

Debidoa que esta técnica separa no solo moléculas muy grandes de moléculas muy pequeñas, sino que además permite la separación de moléculas de tamaños parecidos, esta característica hace que uno pueda...