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PRÁCTICA No. 1
ESPECTROFOTOMETRÍA
Andrea Fernández (201021382), Ana Barillas (201021679), María Cano ( 201021675) Jaqueline González (201113457), Nutrición.

INTRODUCCIÓN
La espectrofotometría es un método analítico que se rige por la ley de Lambert-Beer. Se basa en la relación que existe entre determinar la concentración del compuesto y la absorción de luz por medio de radiacioneselectromagnéticas. En la práctica se determina el espectro de absorción (depende de la estructura química de la sustancia) de una sustancia conocida utilizando un blanco reactivo como solución patrón con el fin de observar el comportamiento de la longitud de onda analítica de la muestra y donde presenta mayor absorción demostrándolo gráficamente por medio de una curva de calibración cuidando deno cometer errores o desviaciones a la hora de realizarlas. La espectrofotometría es importante ya que es una de los métodos más utilizados e indispensable para la química ya que es preciso rápido y tiene un manejo relativamente fácil teniendo varias aplicaciones.


METODOLOGÍA
Un método analítico depende del sistema químico observado y de la calidad de instrumentos para observarlos. Laespectrometría es un método que se basa en las propiedades de las moléculas para absorber energía y ser usada para poder obtener concentraciones donde se utilizan longitudes de onda específicas de cada rango. Este método utiliza medidas de energía radiante, ya se emitida, absorbida o reflejada. Se debe trabajar en lo posible con concentraciones que permitan que se cumpla la ley de Beer para obtener unacurva de calibración que tenga una relación lineal. La absorbancia se utiliza para realizar espectros que tiene una ventaja de ser directamente proporcional a la concentración de moléculas en la sustancia.

RESULTADOS

Gráfica No.1: Espectro de absorción de cloruro de cobalto


Fuente: datos experimentales, obtenidos en el Laboratorio de Bioquímica, Edificio T-12, USAC.
Gráfica 2. Curvade Calibración, longitud de onda de 510 nm.

Fuente: datos experimentales, obtenidos en el Laboratorio de Bioquímica, Edificio T-12, USAC.
Gráfica 3. Curva de Calibración, longitud de onda de 580 nm.

Fuente: datos experimentales, obtenidos en el Laboratorio de Bioquímica, Edificio T-12, USAC.
Gráfica 4. Muestra problema.
Fuente: datos experimentales, obtenidos en el Laboratorio deBioquímica, Edificio T-12, USAC.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

El espectrofotómetro es un equipo que utiliza la capacidad de las soluciones para absorber o transmitir un haz de luz a determinada longitud de onda, teniendo como paso final la lectura de una absorbancia, (Pierre, 1979). Se utilizó como muestra cloruro de cobalto y a través del espectrofotómetro se obtuvieron las distintas absorbancias queayudaron a determinar las concentraciones de la muestra problema.
Como se muestra en la Tabla No. 1 se utilizaron varios valores de medición de luz (nm), se observó una tendencia ascendente y en el punto valorado con 510nm, (esta característica se denomina longitud de onda analítica), se marcó la máxima absorción de luz, por esta razón se escogió este dato para realizar cálculos analíticosposteriores. Cabe mencionar que el dato experimental de la longitud de onda coincidió con el que marca la teoría. Luego los datos marcaron un comportamiento descendiente cumpliendo así con la ley de Lambert-Beer.
Según Aldabe, Bonazzola, Aranmendía, Lacreu (2004): “La ley de Lambert-Beer indica la proporcionalidad directa entre la absorbancia y la concentración”
Para hacer estas comparaciones senecesitó de un blanco, que en este caso fue el HCl, ya que al ser transparente y tener una concentración cercana a la del cloruro de cobalto, permite obtener una mejor lectura de la absorción de la luz proporcionando datos con mayor confiabilidad.
Después de escoger la longitud de onda máxima (510nm) se comparó con la longitud de onda de 580nm para construir dos curvas de calibración y así...