joss

Practica 5
“determinación de nitrógeno”

Antecedentes

Desde hace más de 100 años se está utilizando el método Kjeldahl para la determinación
del nitrógeno en una amplia gama de muestras. La determinación
del nitrógeno Kjeldahl se realiza en alimentos y bebidas, carne, piensos, cereales
y forrajes para el cálculo del contenido en proteína. También se utiliza el método
Kjeldahl para ladeterminación de nitrógeno en aguas residuales, suelos y otras
muestras.
Es un método oficial y descrito en múltiples normativas: AOAC, US-EPA, ISO,
Farmacopeas y distintas Directivas Comunitarias. El método Kjeldahl sirve para
determinar el contenido de nitrógeno en muestras orgánicas e inorgánicas. Se
basa en la digestión de la muestra en ácido sulfúrico concentrado a ebullición,
con laadición de un catalizador. La muestra se digiere hasta disolución y oxidación
de la misma. El nitrógeno contenido en la muestra se convierte en Amonio
Sulfato.
Añadiendo un exceso de solución de sodio hidróxido, el ion amonio es liberado
en forma de amoniaco, destilado y recogido sobre una solución de ácido bórico
o sobre una solución valorada de ácido sulfúrico. El amoniaco recogido esdeterminado
con una solución valorada de ácido o se valora por retroceso con solución
de sodio hidróxido de concentración conocida, si se recogió sobre ácido
sulfúrico. Los resultados se pueden expresar en % N, % NH3 o proteína (%N x
factor).(Edafología, 1991).

Introducción
El nitrógeno es un elemento indispensable para la vida, forma parte de
las principales biomoléculas de todos los seresvivos. Es también uno de los
elementos más abundantes de la Tierra, pues en su forma gaseosa (N2)
constituye 78% de la atmósfera. Sin embargo, la cantidad de nitrógeno
presente en muchos suelos es escasa, debido a su propia dinámica y a
su ciclo biogeoquímico. El nitrógeno puede llegar al suelo gracias a los
aportes de materia orgánica y a la fijación bacteriana a partir del aire.
Dentro delsuelo es aprovechado por las plantas, animales y microorganismos
que lo incorporan a sus tejidos. Cuando dichos organismos se
mueren, el nitrógeno reingresa al suelo completando el ciclo. Este ciclo es
complejo e involucra una serie de reacciones y organismos con diferentes
metabolismos. Siempre comienza con compuestos orgánicos sencillos
(NH4+, NO2-, NO3-, N2, NH3) y termina con compuestosorgánicos complejos;
que a través de la descomposición regresan a la etapa de compuestos sencillos.
En los microorganismos la carencia de nitrógeno puede afectar el crecimiento,
por lo que la población microbiana no tendrá un desarrollo óptimo.
En contraste, demasiado nitrógeno permite el crecimiento microbiano
rápido y acelera la descomposición; pero puede crear problemas de olor
en condicionesanaerobias. Además, el exceso de nitrógeno puede ser liberado
como amoniaco; en tanto que el nitrógeno aprovechable escapará en
forma de gas. Para la mayoría de los materiales una relación C/N cercana
a 10:1 mantendrá estos elementos en equilibrio aproximado. En los
suelos normalmente el contenido de nitrógeno varía de 0.05 a 2% en sus
diferentes formas.

Equipo:
Balanza analíticaMatraces semi-micro kjeldahl
Aparato digestión kjeldhl
Destilador con arrastres de vapor
Matraces Erlenmeyer de 125ml
Micro bureta de 10 ml

Reactivos:
Ácido sulfúrico con indicador
Mezcla reactiva
Hidróxido de sodio aprox.10n
Ácido sulfúrico 0.01N sol valorada

Desarrollo
Para la Digestión Pesamos una muestra de suelo de 0.5 g de muestra
orgánica contenida en el suelo, proseguimosColocamos la muestra de suelo en un matraz Kjeldahl seco.
Adicionamos 2 g de mezcla de catalizadores.(anexos figura 1,2)
Agregamos 10 ml de ácido sulfúrico concentrado.
Pusimos a calentar en el digestor a una temperatura media, hasta que la
muestra se torne clara. La temperatura debe ser regulada de modo que
los vapores de ácido sulfúrico se condensen en el tercio inferior del
cuello del...