Laboratorio: Genética

ESCUELA POLITECNICA DEL EJÉRCITO
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA
CARRERA DE INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA
INFORME N° 1 DEL LABORATORIO DE GENETICA

1. TEMA: Elaboración de medio de cultivo para la especie Drosophila melanogaster
2. OBJETIVOS

2.1. General:
 Fabricar un medio de cultivo adecuado para el crecimiento de la especie Drosophila melanogaster
2.2. Específicos
Realizar una revisión previa del manual de Laboratorio de genética.
 Desarrollar habilidades en el manejo correcto tanto de los equipos como de las instalaciones del laboratorio de la Carrera de Ingeniería en Biotecnología
 Elaborar y obtener medios de cultivo de composición y consistencia adecuada para el buen crecimiento y desarrollo de Drosophila melanogaster
 Conocer la función y loselementos necesarios del medio de cultivo para la proliferación de Drosophila melanogaster

3. MARCO TEORICO
Drosophila melanogaster, conocida también como la mosca de la fruta es pequeña y cosmopolita, es decir, está ampliamente distribuidas en diferentes lugares. El desarrollo de esta tiene un período de embriogénesis y una sucesión de estados de narvales que da lugar a la mosca adulta. El ciclocompleto desde el huevo al adulto demora entre nueve y diez días, a 25º C y un 60% de humedad.
(Ávila, 2009)

El ciclo biológico
 Huevo: De color blanco y recubierto de una gruesa envoltura llamada corión. A las 22 horas a 25ºC emerge la larva.
 Larva: Es la fase de crecimiento. En la cuál presenta un color blanco, vive en la papilla en la cual perfora canales y tiene 3 estadioslarvarios, con dos mudas.
 Pupa: Es la fase de metamorfosis. La larva pupa dentro de su última piel que al principio es blanca y flexible y se endurece y oscurece con el tiempo. Tras pupar los tejidos de la larva se desintegran y se desarrollan los tejidos adultos a partir de unas estructuras embrionarias.
 Adulto: Esta fase comienza cuando emerge de la pupa. Recién salido de la pupa el adulto es decolor blanco y tiene las alas plegadas. Tarda unas 3-4 horas en adquirir color y desplegar las alas y unas 6 horas en alcanzar la madurez sexual. Esto es importante ya que en muchos experimentos es obligatorio trabajar con hembras vírgenes, porque las hembras de Drosophila almacenan esperma de su primera cópula y esto es un gran inconveniente para realizar estudios genéticos que impliquen elcruzamiento entre moscas con diferencias en su ADN. (ver Anexo 1)
(Ávila, 2009)
Medios de cultivo:

Aproximadamente el 90% del éxito en la cría de la Drosophila radica en el medio de cultivo empleado para alimentar las larvas y los adultos. En esencia, el medio de cultivo consiste en una pasta semilíquida, donde las larvas viven y se alimentan a la vez. Para elaborar esta pasta se emplean multitudde ingredientes, y cada laboratorio tiene su propia receta pero la más utilizada se basa en plátano machacado, harina de maíz, levadura de pan y agar como espesante y para evitar contaminaciones se añade un fungicida, normalmente nipagían y un bactericida (ácido propiónico). Esta pasta debe ser cultivada en botellas estériles indicando la fecha y el tipo de cepa o cruce cultivado en cadabotella.
(Guerrero, 2003)

4. MATERIALES Y REACTIVOS

4.1 MATERIALES Y EQUIPOS
Cámara fotográfica 6 frascos de vidrio de 250 ml
Estufa 1 ollas grande y una cuchara de madera
Licuadora Algodón
Plancha térmica o Hot Plate Gasa
Balanza analítica 1 masking
Espátula metálica 1 tijera
Espátula de madera Papel absorbente
Probetas (1000 ml y 10 ml ) Papel aluminio

4.2INGREDIENTES Y REACTIVOS
Para un frasco de 500 ml de capacidad, se emplean los siguientes elementos en las cantidades que se indican en la tabla 1

Tabla 1. Componentes y cantidades de los ingredientes necesarios para elaborar el medio de cultivo para Drosophila melanogaster por cada frasco

Elemento Cantidad
Plátano seda 100g
Levadura de pan 0,48g
Gelatina sin sabor 7.4g
Agua 95,6ml
Jugo de...