lo que sea

Páginas: 20 (4782 palabras) Publicado: 20 de febrero de 2015
ELISA es un ensayo de unión de enzima inmunosorbente. En pocas palabras, es una ´rueba con anticuerpos para poner a prueba la respuesta inmune a elementos que atacan el cuerpo tales como virus, bacterias y alergenos. La prueba se hace en una placa ELISA, también conocida como microplaca 96. El lector ELISA lee la placa.
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Lo que hace un lector ELISA

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Los lectores ELISA o lectores de micro placa hacen espectrofotometría; emiten luz en una longitud de onda y miden la cantidad de luz absorbida y reflejada por un objeto tal como una proteína. Un espectrofotómetro mide la luz ultravioleta y visible. Además, los lectores puedenleer la fluorescencia y la luminiscencia. Las tinturas químicas fluorescentes o emiten un color o longitud de onda cuando se exponen a la luz. La cantidad de reflexión, absorción y la identidad del color se usan para medir la cantidad de sustancia.
Propósito del lector ELISA

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Los lectores ELISA fueron diseñados para pruebas deanticuerpos. Trabajan tan bien que las máquinas se han adaptado a sus propósitos. Los investigadores los usan para el análisis de proteínas y enzimas. También se usa para la detección del HIV y la cuantificación de ácidos nucleicos.
Ventajas del lector ELISA

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Para usar un lector ELISA, la molécula debe estar dusuelta en solución. Unespectrofotómetro requiere entre 400 micro litros y cuatro mililitros, dependiendo del fabricante y modelo. Un lector de placa ELISA necesita de dos a 100 micro litros; los lectores de placa usan menos muestra par obtener un resultado. Los lectores de placa ELISA miden más muestras por unidad de tiempo. Un espectrofotómetro mide de una a seis muestras por vez. Típicamente, una placa ELISA mide 96 veces más.Fundamentos y Tipos de ELISAs. El ELISA se basa e el uso de antígenos o anticuerpos marcados con una enzima, de forma que los conjugados resultantes tengan actividad tanto inmunológica como enzimática. Al estar uno de los componentes (antígeno o anticuerpo) marcado con una enzima e insolubilizado sobre un soporte (inmunoadsorbente) la reacción antígeno-anticuerpo quedará inmovilizada y, portanto, será fácilmente revelada mediante la adición de un substrato especifico que al actuar la enzima producirá un color observable a simple vista o cuantificable mediante el uso de un espectrofotómetro o un colorímetro. Los diferentes tipos de ELISA son los que se enumeran a continuación: • Anticuerpos marcados: 8 ELISA Directo 8 ELISA Indirecto 8 ELISA sándwich ƒ Doble (DAS) ƒ Heterólogo (HADAS)• Antígeno marcado 8 ELISA competitivo ELISA Directo. Consta de las siguientes etapas: • Fijación al soporte insoluble (“tapizado”) de antígenos específicos. Lavado para eliminar los antígenos fijados deficientemente o no fijados. • Adición de anticuerpos marcados (“conjugados”) con una enzima; si los anticuerpos reaccionan con los antígenos, el complejo quedará solubilizado. Lavado para eliminarlos anticuerpos marcados que no hayan reaccionado. • Adición de un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora. Se puede parar la reacción si se desea. • Lectura visual o colorimétrica del producto final coloreado. ELISA Indirecto. Consta de las siguientes etapas: • Fijación al soporte insoluble de antígenos específicos para los anticuerpos objeto de estudio. Lavado para eliminarlos antígenos fijados deficientemente o no fijados. • Adición del suero problema, de tal forma que sus anticuerpos reaccionarán específicamente con los antígenos fijados al soporte. Lavado para eliminar los anticuerpos marcados que no hayan reaccionado. • Adición de anti-anticuerpos conjugados con una enzima, los cuales reaccionan con los anticuerpos específicos añadidos en el paso anterior y...
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