Medios Diferenciales

1. Investigue y elabore un cuadro donde indique composición, fundamento e interpretación de los siguientes MEDIOS DIFERENCIALES:
Medio Diferencial Kliger
Composición Fundamento Interpretación
Peptona de carne 13,0g Diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa y lactosa, y a la producción de ácido sulfhídrico. Por fermentación de azúcares, se producen ácidos, que sedetectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio ácido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrógeno el que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el típico sulfuro de hierro de color negro. 1. Pico alcalino/fondo ácido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa.
2. Pico ácido/fondo ácido
(picoamarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, y lactosa.
3. Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de azúcares.
4. La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo produce gas.
5. El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce ácido sulfhídrico.
Cloruro de Sodio 5,00gLactosa 10,00g
Triptenia 10,00g
Glucosa 1,00g
Citrato de Hierro y Amonio 0,50g
Tiosulfato de sodio 0,30g
Rojo de Fenol 0,025g
Agar 15,00g
Agua destilada 1L
pH Final 7,3







Medio Diferencial Citrato
Composición Fundamento Interpretación
Fosfato de amonio dihidrogenado 1,0g Utilizado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la capacidad de usar citratocomo única fuente de carbono y energía. La utilización de citrato por la bacteria en prueba se detecta por la producción de subproductos alcalinos (amoníaco NH3). El medio posee citrato de sodio como única fuente de carbono y fosfato de amonio como única fuente de nitrógeno.

Citrato de Sodio (enzima) Productos metabólicos alcalinos - pH
Azul de bromotimol (verde; pH 6,9)  azul de bromotimol(azul; pH 7,6) Positivo: producción de un color azul oscuro en el término de 24 a 48 horas, que indica que el microorganismo en prueba ha sido capaz de utilizar el citrato contenido en el medio, con formación de productos alcalinos. También puede ser positivo sin cambio de color, si hay desarrollo visible en la estría de inoculación.

Negativo: el medio permanece de color verde debido a que nohay desarrollo bacteriano y no hay cambio de color.
Cloruro de Sodio 5,00g
Fosfato dipotásico 1,00g
Citrato de Sodio 2,00g
Sulfato de Magnesio 0,20g
Azul de bromotimol 0,08g
Agar 15,00g
Agua destilada csp 1L
pH final 6,9

Medio Diferencial DNAsa
Composición Fundamento Interpretación
Triptosa 20,00g Los microorganismos DNAsa positivos degradan el DNA cuando son incubadosen un medio que lo contiene. Esto puede ser visualizado de diferentes maneras: ya sea inundando las placas crecidas con HCl0,1 N y observando zonas transparentes alrededor de las estrías o incorporando al medio indicadores como azul de toluidina o verde de metilo (viran a rosado cuando el test es positivo) Un resultado positivo está dado por el viraje del indicador en la zona de la estría arosado
ADN 2,00g
Cloruro de sodio 5,00g
Azul de toluidina o´ Verde de metilo 0,50g
Agar 15,00g
Agua destilada 1L


Medio Diferencial LIA (Lisina Hierro Agar)
Composición Fundamento Interpretación
Lisina 10,0g Esta prueba permite diferenciar los microorganismos que producen descarboxilación o desaminación de la lisina. Se pude detectar además la producción de Sulfuro de hidrogeno(SH2) que se visualiza por el ennegrecimiento del medio debido a la formación de sulfuro de hierro.

Lisina (enzima descarboxilasa)  amina cadaverina - pH
Lisina (enzima desaminasa)  -cetoácido - pH
Purpura de bromocresol (amarillo; pH 5,2)  purpura de bromocresol (violeta; pH 6,8) Descarboxilación de la lisina:
Positiva: Pico violeta/fondo violeta.
Negativa: Pico violeta/fondo...