Metabolismo De Lipidos (Trigliceridos Y Colesterol

PRÁCTICA N° 8
Metabolismo de Lípidos I

I. INTRODUCCIÓN.
Los lípidos son un conjunto de moléculas orgánicas, la mayoría biomoléculas, compuestas principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida oxígeno, aunque también pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno. Tienen como característica principal el ser hidrófobas (insolubles en agua) y solubles en disolventes orgánicos como labencina, el benceno y el cloroformo. En el uso coloquial, a los lípidos se les llama incorrectamente grasas, ya que las grasas son sólo un tipo de lípidos procedentes de animales. Los lípidos cumplen funciones diversas en los organismos vivientes, entre ellas la de reserva energética (como los triglicéridos), la estructural (como los fosfolípidos de las bicapas) y la reguladora (como las hormonasesteroides).
Los ácidos grasos (AG) son los componentes principales de los lípidos complejos (triacilgliceroles, fosfolípidos). Los triacilgliceroles son la forma más importante de almacenamiento de energía en los animales. Este tipo de almacenamiento presenta sus ventajas, al oxidarse el C de los AG producen más ATP que cualquier otra forma de C, además, los lípidos están menos hidratados que lospolisacáridos, por lo que ocupan menos espacio. Los AG se incorporan a las membranas celulares. El principal órgano de interconversión y metabolismo de lípidos es el hígado.
La determinación del perfil lipídico tiene gran importancia clínica en el diagnostico de enfermedades metabólicas e incluye el análisis de:
1. lípidos totales
2- triglicéridos
3- colesterol
4- fosfolipidos
5-electroforesis de proteínas

II. OBJETIVOS.
1. Determinar la concentración de colesterol y triglicéridos en sangre.
2. Conocer los valores normales y patológicos que se suelen observar en un perfil lipídico.
III. MATERIAL Y PROCEDIMIENTOS.
3.1. Materiales y equipos
3.2.1. Materiales:
A. Biológico:
* Suero sanguíneo
B. De vidrio:
* 08 tubos de ensayo13 x 100
* 01 bagueta
C. Reactivos:
* 01 kit de determinación de colesterol
* 01 kit de determinación de triglicéridos
* Etanol 30 mL
* Agua destilada 500 mL
3.2.2. Equipos e instrumentos:
* 01 Baño maría
* 01 Espectrofotómetro
* 01 Centrifuga
* Micropipetas de 2-20 µL, 50-100 µL, 100 – 1000 µL
* 02 Gradillas
3.2.3.Otros:
* 02 pares de guantes descartables
* 05 torundas de algodón
* 03 agujas descartables 20 x 1 ½”
* 20 Tips de micropipetas (2-50, 100-1000 µL)
* 10 Cubetas para espectrofotómetro 1 mL
* 01 Ligadura
* 01 Marcador indeleble
* 01 Calculadora
3.2. Procedimientos.
3.3.4. Determinación de Trigliceridos en sangre
* Extraer una muestra de sangre deuna persona en ayuno
* Obtener suero de manera usual y proceder de acuerdo a lo siguiente
Tubo | | Blanco | Standard | Muestra |
Muestra (suero) | (µL) | --- | --- | 10 |
Standard | (µL) | --- | 10 | --- |
Reactivo de trabajo | (µL) | 1000 | 1000 | 1000 |
Mezclar e incubar 5 minutos en baño de agua a 37°c y leer a 505 nm, llevando el aparato a cero con el blancode reactivo. El color es estable 30 minutos |







* Cálculos
Factor =200 Absorbancia del estandar
Triglicéridos (mg/dl) = Factor x Absorbancia de la muestra |


* Valores Normales: 25 – 160 mg/dL
3.3.5. Determinación de colesterol en sangre.
* Extraer una muestra de sangre de una persona en ayuno (12 horas).
* Obtener suero de manera usual yproceder de acuerdo a lo siguiente:

Tubo | | Blanco | Standard | Muestra |
Muestra (suero) | (µL) | --- | --- | 10 |
Standard | (µL) | --- | 10 | --- |
Reactivo de trabajo | (µL) | 1000 | 1000 | 1000 |
Mezclar e incubar 10 minutos en baño de agua a 37°c y leer a 505 nm, llevando el aparato a cero con el blanco de reactivo. El color es estable 30 minutos |

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