Metodos Potenciometricos
Páginas: 5 (1085 palabras)
Publicado: 11 de noviembre de 2012
Universidad de oriente
Escuela de ciencias
Departamento de bioanálisis
Núcleo sucre.
Práctica Nº: 1 Espectroscopia de Absorción Molecular.
Profesora: Realizado por:
Maza AnahysEspinoza Anyoly
C.I: 20563585
Torrez Rosalis
C.I: 21012504Sifontes Vanessa
C.I: 20343254
Cumaná, junio del 2012.
Metodología
En esta práctica estudiaremos la absorción de luz en la zona de radiación visible (גּ≈330-800 nm) y la radiación ultravioleta situada pordebajo de (גּ≈330nm). Cuando una molécula absorbe un fotón en este intervalo espectral, se excita pasando un electrón de un orbital del estado fundamental a un orbital excitado de energía superior.
Los espectros de absorción se miden mediante un instrumento denominado espectrofotómetro. Los instrumentos que vamos a usar en esta práctica constan de una fuente de luz “blanca” caracterizada por unespectro de emisión continuo en un intervalo amplio de longitudes de onda (en nuestro caso 450-550nm) y de un monocromador que actúa como filtro óptico transmitiendo un haz de luz de longitud de onda fija גּ l e intensidad Io. Este haz de luz penetra en la cubeta de análisis donde se encuentra la muestra. Un detector sensible a la luz mide la intensidad del haz a la salida
If.
Procedimiento:➢ Se tomo una muestra de orina y se realizaron las siguientes diluciones: 1:10, 1:50 y 1:100. Luego se rotularon tres balones aforados de 10 ml y se agregaron 1 ml de las soluciones anteriores y se enrasaron con agua destilada; posteriormente se rotularon 8 tubos de ensayos.
➢ En los tubos 1, 2, 3, 4 se agregaron 5 ml del patrón correspondiente (0.2, 0,4, 0,6, 0,8 mg/ dl).➢ Al tubo 5 ( Blanco) se le agregaron 5 ml de agua destilada y a los tubos 6, 7 y 8 se le agregaron 5 ml de la muestra problema correspondiente. luego a cada uno de los tubos se le agregaron 1 ml de NaOH a 0,75 mol/l y 1 ml de acido pícrico a 0,04 mol/l; se agitaron y se dejo reposar por aproximadamente 5 minutos.
➢ Se tomo un patrón de picrato de creatinina (0,4 mg/ dl) para leer laabsorbancia en el espectrofotómetro, calibrando el instrumento con el blanco (tubo 5) cada vez que varíe la longitud de onda. Una vez determinada esta longitud de onda, se leyeron las absorbancia de los demás patrones (tubos 1-4) para la realización de la curva de calibración. Y por ultimo se midieron las absorbancia correspondientes a las muestras problema (tubos 6-8)Objetivo General:
• Determinación de creatinina en muestra de orina.
Objetivos específicos:
• Determinar la concentración de creatinina en muestras de orina mediante métodos analíticos: curva de calibración, factor de calibración u método de comparación directa.
• Verificar aspectos teóricos y prácticos de lafotometria y los instrumentos que se aplican en ella.
• Determinación fotométrica de la concentración de una sustancia para conocer la longitud de onda de máxima absorción de radiación para dicha sustancia.
Introducción
Un método espectrofotométrico está basado en la medida directa de la absorción de radiación...
Escuela de ciencias
Departamento de bioanálisis
Núcleo sucre.
Práctica Nº: 1 Espectroscopia de Absorción Molecular.
Profesora: Realizado por:
Maza AnahysEspinoza Anyoly
C.I: 20563585
Torrez Rosalis
C.I: 21012504Sifontes Vanessa
C.I: 20343254
Cumaná, junio del 2012.
Metodología
En esta práctica estudiaremos la absorción de luz en la zona de radiación visible (גּ≈330-800 nm) y la radiación ultravioleta situada pordebajo de (גּ≈330nm). Cuando una molécula absorbe un fotón en este intervalo espectral, se excita pasando un electrón de un orbital del estado fundamental a un orbital excitado de energía superior.
Los espectros de absorción se miden mediante un instrumento denominado espectrofotómetro. Los instrumentos que vamos a usar en esta práctica constan de una fuente de luz “blanca” caracterizada por unespectro de emisión continuo en un intervalo amplio de longitudes de onda (en nuestro caso 450-550nm) y de un monocromador que actúa como filtro óptico transmitiendo un haz de luz de longitud de onda fija גּ l e intensidad Io. Este haz de luz penetra en la cubeta de análisis donde se encuentra la muestra. Un detector sensible a la luz mide la intensidad del haz a la salida
If.
Procedimiento:➢ Se tomo una muestra de orina y se realizaron las siguientes diluciones: 1:10, 1:50 y 1:100. Luego se rotularon tres balones aforados de 10 ml y se agregaron 1 ml de las soluciones anteriores y se enrasaron con agua destilada; posteriormente se rotularon 8 tubos de ensayos.
➢ En los tubos 1, 2, 3, 4 se agregaron 5 ml del patrón correspondiente (0.2, 0,4, 0,6, 0,8 mg/ dl).➢ Al tubo 5 ( Blanco) se le agregaron 5 ml de agua destilada y a los tubos 6, 7 y 8 se le agregaron 5 ml de la muestra problema correspondiente. luego a cada uno de los tubos se le agregaron 1 ml de NaOH a 0,75 mol/l y 1 ml de acido pícrico a 0,04 mol/l; se agitaron y se dejo reposar por aproximadamente 5 minutos.
➢ Se tomo un patrón de picrato de creatinina (0,4 mg/ dl) para leer laabsorbancia en el espectrofotómetro, calibrando el instrumento con el blanco (tubo 5) cada vez que varíe la longitud de onda. Una vez determinada esta longitud de onda, se leyeron las absorbancia de los demás patrones (tubos 1-4) para la realización de la curva de calibración. Y por ultimo se midieron las absorbancia correspondientes a las muestras problema (tubos 6-8)Objetivo General:
• Determinación de creatinina en muestra de orina.
Objetivos específicos:
• Determinar la concentración de creatinina en muestras de orina mediante métodos analíticos: curva de calibración, factor de calibración u método de comparación directa.
• Verificar aspectos teóricos y prácticos de lafotometria y los instrumentos que se aplican en ella.
• Determinación fotométrica de la concentración de una sustancia para conocer la longitud de onda de máxima absorción de radiación para dicha sustancia.
Introducción
Un método espectrofotométrico está basado en la medida directa de la absorción de radiación...
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