Metodos Serologicos

Identificación de bacterias por reacciones serológicas
Objetivo.-
Conocimiento teórico de las principales técnicas serológicas utilizadas en el
diagnóstico microbiológico y desarrollo de una técnica de aglutinación en placa
para obtener bases aplicativas.
Introducción.-
Los linfocitos B son los leucocitos de los cuales depende la inmunidad mediada por anticuerpos con actividadespecífica de fijación de antígenos. Las células B, que constituyen un 5 a 20% del total de linfocitos dan origen a las células plasmáticas que producen anticuerpos.
Los linfocitos son de dos tipos principales, atendiendo a su origen y función: células T, que se diferencian inicialmente en el timo, y las células B, que se diferencian en el hígado y bazo fetal, y en la médula ósea del adulto (la 'B'proviene del latín Bursa fabricii, el órgano en el cual se desarrollan los linfocitos B en las aves). Durante su desarrollo, los linfocitos T y B adquieren receptores específicos para antígenos, el de las células B se le conoce como Receptor de linfocito B (BCR).
Los linfocitos T o células T pertenecen al grupo de leucocitos que son conocidos como linfocitos. Estas células tienen núcleos de formaovoide que ocupan la mayoría del espacio intracelular.
Los linfocitos T son los responsables de coordinar la respuesta inmune celular constituyendo el 70% del total de los linfocitos que segregan proteínas o citoquinas. También se ocupan de realizar la cooperación para desarrollar todas las formas de respuestas inmunes, como la producción de anticuerpos por los linfocitos B.
Se diferencian de loslinfocitos B y de las células asesinas (natural killer o NK) por poseer un receptor especial en la superficie de la membrana, el Receptor de linfocitos T (denominado TCR por T cell receptor). Sin embargo, en un frotis microscópico de sangre no es posible distinguir uno de otro a simple vista.
La denominación de estos linfocitos como "T" se debe a que su maduración tiene lugar en el timo (órganolinfoide que constituye uno de los controles centrales del sistema inmunitario del organismo). El número de leucocitos en sangre periférica en un humano promedio es de 4 a 11 x 10 9 por litro, del cual, normalmente, un 20% son linfocitos.

Pruebas de aglutinación: Se basan en la unión de antígenos particulados a los
anticuerpos, preferentemente de clase IgM. Suele tratarse de pruebas muysensibles pero con poca especificidad. Ejemplos de este tipo de pruebas es la aglutinación con rosa de Bengala empleada en el diagnóstico de la brucelosis.

Pruebas de precipitación: En este caso se utilización antígenos solubles que se
difunden frente a los anticuerpos. La unión antígeno-anticuerpo precipita de
forma visible y permite establecer la presencia de anticuerpos específicos. Unejemplo clásico de este tipo de pruebas es la inmunodifusión en gel de agar
utilizada históricamente en el diagnóstico de la leucosis bovina.

Difusión Simple: En un tubo pequeño se deposita la solución del antígeno sobre
una solución del antisuero, mismas que al difundir forman un anillo de precipitación
en la interfase.
Doble difusión: En el método de Ouchterlony los reactivos difunden desdepocillos
excavados en una placa de agar. Las bandas de precipitación aparecen entre los
dos pocillos correspondientes a antígeno y anticuerpo.

Cuando se aplica la electroforesis al estudio de las reacciones antígeno anticuerpo,
se le denomina electroforesis. Es un proceso electroquímico en el que las
partículas o macromoléculas coloidales suspendidas, con una carga eléctrica neta,emigran en solución o en el gel de agar, bajo la influencia de una corriente
eléctrica. Las cargadas positivamente emigran hacia el cátodo, mientras que las
negativas van hacia el ánodo. Cuando se deposita una solución que contiene
antígenos proteicos en un pocillo excavado dentro de una lámina de agar y se
aplica la corriente eléctrica, los antígenos se distribuyen en manchas separadas...