Micosporinas
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Publicado: 24 de febrero de 2011
Preparación delextracto del alga para determinar micosporinas
Muestras secas del alga se tamizan en tamiz de 40 mesh.
Porciones de muestras (0.250 g) fueronagitados durante la noche a 4 °C, en 3 mL H2O según Carreto, Carignan, and Montoya (2005). Adicionar 14 mL metanol y sonicar por 5 min en un baño de hielo(Branson 5210 sonicator, 40 kHz, VWR International, Mississauga, ON). Seguidamente centrigugar (4 °C, 15 min, 3000 rpm) y colectar el sobrenadante, elresiduo será extraído dos veces con 17 mL metanol y el sobrenadante colectado y unido a lo anterior. Los extractos serán entonces concentradosroto-evaporación, 40 °C, y liofilizado en frasco de 25 mL. El extracto del alga será solubilizado en 400 μL de H2O, sonicados (5 min), y pasados a través de unfiltro de jeringa de 0.20 μ a un vial de vidrio con inserto (Chromatographic Specialties Inc., Brockville, ON) para el análisis HPLC y LC/MS, y/o usadosen la actividad antioxidante por ORAC y el estudio de proliferación cellular.
J.I. Carreto, M.O. Carignan and N.G. Montoya, A high-resolutionreverse-phase liquid chromatography method for the analysis of mycosporine-like amino acids (MAAs) in marine organisms, Marine Biology 146 (2005), pp. 237–252.
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