Micro

Presentación del material de laboratorio
Objetivos:
Reconocer y manejar el material de uso común en el laboratorio de microbiología
Tomar conciencia y aplicar las reglas de bioseguridad en el laboratorio de microbiología
Clasificación de los materiales por el tipo de material empleado en su fabricación:
a) Material de vidrio

placa petri cubre y portaobjeto
b) Material de porcelana
Mortero y pilón
Crisol
c) Material de metal


d) Material de plástico

pisceta
e) Material de papel

Papel filtro


Cinta indicador de pH
Otros
escobillas

algodón



Coloraciones
Tinción compuesta-tincion de gram
Etapas en la tinción de gram:
Frotar suavemente el epitelio bucal con la lámina portaobjetos en una sola dirección, cubrir la muestra con cristalvioleta (3 gotas) reposar por 1 min; eliminar el exceso de colorante, lavar con agua corriente y secar.
Colocar lugol (3 gotas) pasado el minuto se lava con agua el exceso de lugol

Cubrir la muestra con alcohol acetona (3 gotas) pasado el minuto se lava con agua el exceso de alcohol

Cubrir la muestra con safranina (3 gotas) lavar en el lavadero y esperar 1min, luego flamear con el mechero bunsen.Colocar el cubreobjetos encima de la muestra, observar en el microscopio.


Esterilización por calor
Objetivos:
Realizar la práctica de envoltura y acondicionamiento de los materiales para su posterior esterilización.
Llevar a la práctica los pasos necesarios en el uso de la autoclave, la estufa y el mechero bunsen.
Materiales:
06 Placa petri normax
06 hisopos
03 pipetas de 10 ml
06 tubos 16x150ml sin tapa rosca
algodón
Agua destilada
Papel kraf
Procedimiento (método):
Lavar el material de vidrio con agua y sapolio luego enjuagar con agua destilada, proceder a colocar en la estufa por 120ºc x2 horas luego envolver las placas petri con el papel kraf apilando de 3 en 3 con la tapa hacia la parte posterior.
Los tubos colocarles un tapón hecho de algodón también envolver como las placaspetri con papel kraf y las 6 juntas.
Los hisopos envolverlos con papel kraf; al igual que las pipetas pero están una por una.
Para esterilizar; el equipo una estufa se programa a 120ºc colocar todo el material y esperar x3 horas.

Medios de cultivo
Objetivos:
Alcanzar practica en el preparado de algunos medios de cultivo a partir de cultivo en la práctica microbiológica.
Reconocer la necesidad deevitar la contaminación tanto de los medios de cultivo como de los demás elementos utilizados en el laboratorio de microbiología.
Procedimiento (método):
1. Pesar agar nutritivo(es usado como crecimiento para todo tipo de bacterias) (28g/L).- en una balanza con papel kraf

2. Verter en el frasco con tapa azul.- en un frasco agregar 2,8 de agar con 100 ml de agua destilada, en otro frasco agregar4,2 de agar con 150 ml de agua destilada
3. Baño maría.-se colocara los frascos para que se licue, se utilizara la cocinilla eléctrica y agitar
4. Autoclavar.-en el equipo autoclave funciona con agua destilada y colocar los 2 frascos tienen que llegar a 121ºc x 30 minutos con una presión de 1,2kg/cm2, esperar para poder abrir el equipo autoclave.

5. Dejar enfriar a 40ºc

6. Plaquear.-el agarde los frascos vaciar en las placas petri esterilizadas para que se gelifique; deben de estar 2 mecheros con llama alta.

7. Enfriar las placas(gelificar)
8. Sembrar.-usar los hisopos (esteriles) hisopar en la boca y frotar en la placa que esta con agar.
9. Incubadora a 37ªc.- envolver las placas petri con el papel kraf guardarlas en la estufa a 37ºc x 24 ó 48 horas.

10. Lectura.- después de 24horas

Mayor a 300 u.f.c(unidad formadora de colonias)

TINCION DE GRAM
Objetivos:
Interpretar el fundamento de las coloraciones en la práctica microbiológica.
Materiales, equipos, reactivos:
Asa de col
Mechero bunsen
Placa cubre y porta objeto
Microscopio óptico compuesto biocular
Procedimiento (método):
A cada una de las muestras A, B, C y en orden se procederá lo siguiente:

Con el asa de...