Microbiologia Bacteriana
Páginas: 13 (3160 palabras)
Publicado: 3 de septiembre de 2011
+++++Fundamentos de la Tinción de Gram
El imperceptible tamaño de las bacterias y otros microorganismos así como la dificultad para observarlas en detalle con el microscopio óptico por causa de la falta de contraste que existe entre estos, debido a que son usualmente transparente en el medio que les rodea; hizo que se crearan métodos para poder apreciarlas, siendo “los métodos más sencillos elde fijación y tinción, iniciados por Paul Ehrlich y Robert Koch, los que permitieron a los microbiólogos distinguir muchas características estructurales normalmente vistas” así el uso de colorantes, es el medio más simple de aumentar el contraste. Estos pueden utilizarse para distinguir entre distintos tipos de células o para apreciar la presencia de algunos elementos celulares, como flagelos,esporas, cápsulas, paredes celulares, mitocondrias, núcleos, membranas celulares, etc.
Existen numerosos colorantes, y en su mayoría son compuestos orgánicos naturales que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Los colorantes que se utilizan usualmente son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los componentes celulares cargadosnegativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos (azul de metileno, el cristal violeta y la safranina); otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) los que se combinan con los elementos celulares cargados positivamente, como son las proteínas (Eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo). Existe otro grupo de colorantes conformado por sustancias liposolubles; loscolorantes de este grupo se combinan con los materiales lipídicos de la célula, usándose generalmente para revelar la localización de los depósitos de grasa (negro de Sudán).
La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio de microbiología. Su aplicación práctica es innegable sobre todo en el trabajo microscópico de rutina; las referencias a la morfologíacelular bacteriana (cocos, bacilos, espirilos, negativos y positivos fig1) se basan precisamente en la tinción de GRAM*
Esta técnica de coloración de contraste fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. Es de considerarse que la reacción de Gram no es infalible ni constante; puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio, y quizá por otras causas.
La capacidad de las células paracaptar la coloración Gram solo es aplicable de manera adecuada en bacterias; como puede advertirse en las células de vegetales y animales superiores, que no conservan uno de los colorantes de los que está compuesta la técnica; los hongos miroscópicos se tiñen con cierta irregularidad; los gránulos de micelios tienden a retener el colorante.
El fundamento de la técnica se hace con base en lasdiferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativas
La pared celular de las bacterias Gram positivas (fig 2 ) posee una gruesa capa de peptidoglucano , además de dos clases de ácido teicoico. Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el acodo lipòteicoico y en la superficie, el ácido teicoico que estáanclado solamente en el peptidoglucano (también conocido como mureína)
Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (de composición distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana exterior por lipoproteínas La membrana exterior está hecha deproteína, fosfolípido fig 3 y lipopolisacárido (que se encuentra en la cara externa de la membrana externa de este tipo de bacterias)
La clave es el peptidoglucano o mureína (fig4), ya que es el material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha mayor proporción que las Gram negativas. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen de...
El imperceptible tamaño de las bacterias y otros microorganismos así como la dificultad para observarlas en detalle con el microscopio óptico por causa de la falta de contraste que existe entre estos, debido a que son usualmente transparente en el medio que les rodea; hizo que se crearan métodos para poder apreciarlas, siendo “los métodos más sencillos elde fijación y tinción, iniciados por Paul Ehrlich y Robert Koch, los que permitieron a los microbiólogos distinguir muchas características estructurales normalmente vistas” así el uso de colorantes, es el medio más simple de aumentar el contraste. Estos pueden utilizarse para distinguir entre distintos tipos de células o para apreciar la presencia de algunos elementos celulares, como flagelos,esporas, cápsulas, paredes celulares, mitocondrias, núcleos, membranas celulares, etc.
Existen numerosos colorantes, y en su mayoría son compuestos orgánicos naturales que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Los colorantes que se utilizan usualmente son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los componentes celulares cargadosnegativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos (azul de metileno, el cristal violeta y la safranina); otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) los que se combinan con los elementos celulares cargados positivamente, como son las proteínas (Eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo). Existe otro grupo de colorantes conformado por sustancias liposolubles; loscolorantes de este grupo se combinan con los materiales lipídicos de la célula, usándose generalmente para revelar la localización de los depósitos de grasa (negro de Sudán).
La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio de microbiología. Su aplicación práctica es innegable sobre todo en el trabajo microscópico de rutina; las referencias a la morfologíacelular bacteriana (cocos, bacilos, espirilos, negativos y positivos fig1) se basan precisamente en la tinción de GRAM*
Esta técnica de coloración de contraste fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. Es de considerarse que la reacción de Gram no es infalible ni constante; puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio, y quizá por otras causas.
La capacidad de las células paracaptar la coloración Gram solo es aplicable de manera adecuada en bacterias; como puede advertirse en las células de vegetales y animales superiores, que no conservan uno de los colorantes de los que está compuesta la técnica; los hongos miroscópicos se tiñen con cierta irregularidad; los gránulos de micelios tienden a retener el colorante.
El fundamento de la técnica se hace con base en lasdiferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativas
La pared celular de las bacterias Gram positivas (fig 2 ) posee una gruesa capa de peptidoglucano , además de dos clases de ácido teicoico. Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el acodo lipòteicoico y en la superficie, el ácido teicoico que estáanclado solamente en el peptidoglucano (también conocido como mureína)
Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (de composición distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana exterior por lipoproteínas La membrana exterior está hecha deproteína, fosfolípido fig 3 y lipopolisacárido (que se encuentra en la cara externa de la membrana externa de este tipo de bacterias)
La clave es el peptidoglucano o mureína (fig4), ya que es el material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha mayor proporción que las Gram negativas. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen de...
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