Microscopia Electronica

Un microscopio electrónico es aquél que utiliza electrones en lugar de fotones o visible para formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos permiten alcanzar hasta 5000 veces más potentes que los mejores microscopios ópticos) debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones "visibles".
El primer microscopio electrónico fue diseñadopor Ernst Ruska y Max Knoll entre 1925 y 1930, quiénes se basaron en los estudios de Louis-Victor de Broglie acerca de las propiedades ondulatorias de los electrones.

El material biológico presenta dos problemas fundamentales: el entorno de vacío y la transferencia de energía. Para resolverlos, se utilizan distintas técnicas dependiendo del tamaño de la muestra:

* Para muestras grandescomo órganos, tejidos o células, se utilizan tres técnicas:
1. La fijación química o la criofijación
2. La inclusión en resinas (criosustitución)
3. La réplica metálica

* Para muestras pequeñas como complejos macromoleculares se utilizan las siguientes técnicas:‏

1. La tinción negativa: los agentes de tinción más usados son el molibdato amónico, el fosfotungstato sódico ysales de uranio como acetato y formiato. Todos ellos presentan las siguientes propiedades: interactúan mínimamente con la muestra y son estables en la interacción con los electrones, son altamente solubles en agua, presentan una alta densidad que favorece el contraste, tienen un punto alto de fusión, tienen un tamaño de grano pequeño.

2. La réplica metálica: para construir la réplica metálicase evapora el metal (estaño), que se deposita sobre la muestra a la vez que esta, por el vacío, se disuelve.

3. La criomicroscopía



Microscopio electrónico de transmisión.
Un microscopio electrónico de transmisión, es un microscopio que utiliza un haz de electrones para visualizar un objeto.
Lo característico de este microscopio es el uso de una muestra ultra fina yque la imagen se obtenga de los electrones que atraviesan la muestra.
Los microscopios electrónicos de transmisión pueden aumentar un objeto hasta un millón de veces.

Las partes principales de un microscopio electrónico de transmisión son:

* Cañón de electrones, que emite los electrones que chocan o atraviesan el espécimen (dependiendo que tipo de microscopio electrónico es),creando una imagen aumentada.

* Lentes magnéticas para crear campos que dirigen y enfocan el haz de electrones, ya que las lentes convencionales utilizadas en los microscopios ópticos no funcionan con los electrones.

* Sistema de vacío es una parte muy importante del microscopio electrónico. Debido a que los electrones pueden ser desviados por las moléculas del aire, se debe hacer un vacíocasi total en el interior de un microscopio de estas características.

* Placa fotográfica o pantalla fluorescente que se coloca detrás del objeto a visualizar para registrar la imagen aumentada.

* Sistema de registro que muestra la imagen que producen los electrones, que suele ser una computadora.

El microscopio electrónico de transmisión emite un haz de electrones dirigido haciael objeto que se desea aumentar. Una parte de los electrones rebotan o son absorbidos por el objeto y otros lo atraviesan formando una imagen aumentada de la muestra.
Microscopio electrónico de Barrido.
El Microscopio electrónico de barrido o SEM (Scanning Electron Microscope), es aquel que utiliza un haz de electrones en lugar de un haz de luz para formar una imagen. Tiene una gran profundidadde campo, la cual permite que se enfoque a la vez una gran parte de la muestra. También produce imágenes de alta resolución, que significa que características espacialmente cercanas en la muestra pueden ser examinadas a una alta magnificación. La preparación de las muestras es relativamente fácil pues la mayoría de SEMs sólo requieren que estas sean conductoras.

Son ampliamente utilizados en...