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1. Complete el siguiente cuadro haciendo los cálculos necesarios
Tubo
H O ml
(NH ) SO 5 X 10 M
nmoles de amonio por tubo
nmoles de urea por tubo
ReactivoNessler
Absorbancia
Absorbancia Neta
1
0.1 ml
0.5 ml
0.216
2
0.2 ml
0.5 ml
0.332
3
0.3 ml
0.5 ml
0.442
4
0.4 ml
0.5 ml
0.560
5
0.5 ml
0.5ml
0.680
6
0.6 ml
0.5 ml
0.790
Blanco
4.5
-----
0.5 ml
0.100
Expresión de Resultados
1. Anote en la siguiente tabla los volúmenes del os reactivos que midió paracada sistema
Sistema de ensayo
Blanco o Control
Solución de urea 0.3 M
Buffer Fosfato pH 7.4
Solución de ureasa 0.6 mg/ml
Volumen total del tubo
Las absorbanciasobtenidas, fueron:
a) Sistema de ensayo ________________
b) Blanco ________________
Complete lo siguiente:
a) nmoles de urea hidrolizada: ___________
b) nmolesde urea hidrolizada por minuto: ____________
c) Actividad molecular de la ureasa: ____________
Nota: Para el cálculo de la actividad molecular considerar el PM de la ureasa es de500,000.
INTERROGANTES.
1. Que es la KM y qué importancia y significado tiene? En que unidades se la expresa.______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2. Que es la velocidad máxima?En que unidades se le expresa.______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
3. Como se explica el efecto de la temperatura sobre la velocidad inicial de una enzima? Que es temperatura optima?...
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