Nmp: Número Más Probable

INTRODUCCIÓN
Con la metodología de NMP (Número Más Probable), se puede llegar a determinar la presencia o ausencia, en replicas de diluciones consecutivas de atributos particulares de microorganismos presentes en muestras de suelo u otros ambientes. Algunas de las ventajas de la ejecución de esta prueba son la estimación de tamaños de poblaciones en algunos ambientes, provee una recuperación delas poblaciones microbianas de distintos suelos o ambientes, determina solo organismos vivos y metabólicamente activos y es confiable y más rápido que otros métodos. En la práctica realizada en el laboratorio tenía como fin, hacer las pruebas de número más probable (NMP) y el recuento de colonias. Se realizó principalmente tomando Escherichia coli y aplicándola en diluciones con diferentes tubosde ensayo estériles. Se tenían 5 tubos de ensayo con NaCl, al primero se le aplico 1ml de la bacteria, después se retiraba un mililitro del primer tubo y se le aplicaba al segundo, después del segundo al tercero y así sucesivamente. Después de cada tubo de ensayo se retiraba un mililitro a 3 tubos con caldo verde brillante, para conocer el número de bacterias y si son fermentadoras. Otro métodorealizado fue tomando las diluciones con la bacteria de los primero tubos trabajados, cultivarlas en agar solido y después de esto se le aplico otra capa de agar liquido encima de donde se el agar donde se ubicaron las bacterias (se cultivaron en agares diferentes dependiendo de la disolución en que se encontraban en los tubos de ensayo; este método sirve para saber el número más probable debacterias que se encuentran en el cultivo inicial. La práctica se realizo en un medio estéril porque podría haber falsos resultados ya que podrían presentar colonias parecidas y no se podrían diferenciar.

MARCO TEORICO
El método del número más probable (NMP), al igual que el método de recuento en placa, permite realizar un recuento bacteriano. Se basa en el principio de que una única célula viva puededesarrollarse y producir un cultivo turbio. El NMP requiere la realización de una serie de diluciones, en un medio líquido adecuado para el crecimiento bacteriano. Posteriormente, se incuban los tubos. Una vez que ha pasado suficiente tiempo como para que crezca el microorganismo, se examinan los tubos. Aquellos tubos que fueron inoculados con una o más células microbianas a partir de la muestra,se pondrán turbios, mientras que los tubos que no recibieron ninguna célula permanecerán transparentes. A medida que se aumenta el factor de dilución, se alcanzará un punto en el cual algunos tubos contendrán tan sólo un organismo y otros, ninguno. Al determinar la probabilidad de que los tubos no recibieran ninguna célula, se puede determinar el número más probable de microorganismos presentesen la muestra original, utilizando para ello una tabla estadística.
La precisión del número más probable aumenta con el número de tubos que se usan. El método del NMP se utiliza para contar microorganismos que son difíciles de cultivar en medio sólido. También se usa para determinar el número de células de un cultivo mixto que pueden crecer en un medio líquido determinado. Por ejemplo, puedeemplearse para determinar la contaminación del agua potable, determinando el número de bacterias que pueden crecer en un medio que contiene lactosa. Estas bacterias probablemente sean Escherichia coli provenientes de aguas residuales contaminadas, y la presencia de E. coli en el agua potable es una prueba presuntiva de contaminación.
El caldo verde brillante es un medio usado para el recuento decoliformes totales y fecales, por la técnica del número más probable. En este medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y el verde brillante son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y Gram negativas a excepción de coliformes, y la lactosa es el hidrato de carbono fermentable. Es una...