Numero Mas Probable Del Agua

Laboratorio N°4
“Número mas probable en agua”

Introducción
El agua es un recurso natural necesario para el desarrollo de un gran número de actividades humanas, debido a que las aguas son de composición variada, contienen diferentes tipos de microorganismos contaminantes. La variada población de microorganismos en el agua, proviene del suelo y de origen intestinal, incluyen aerobios yanaerobios estrictos y facultativos así como también numerosos virus. Los análisis que se pueden realizar al agua para controlar su calidad son físicos, químicos y microbiológicos, en esta ocasión se hará una determinación microbiológica.
l
Objetivo

Determinación de coliformes fecales y totales a través de la siembra del número más probable en agua potable.

Objetivos específicos

Aprender aocupar la técnica del número más probable, utilizando la técnica de tubos de fermentación múltiple.

Materiales
Tubos de ensayo | Lapiz |
Mechero Bunshen | Gradilla |
Baño maria | asa |
Espatula | Caldo Lauril Sulfato |
Pipeta | Bilis Verde Brillante |
Horno | Echerichia Coli |

Procedimiento

Etapa presuntiva

Se tenían tres series sucesivas de 15 tubos que contenían caldolauril sulfato, los 5 primeros tubos contenían doble concentración y los 10 restantes contenían concentración simple.
* A los primeros 5 tubos se les incorporo 10 ml de la muestra de agua potable.
* A los 5 tubos siguientes se le incorporo 10 ml de la muestra de agua potable.
* A los últimos 5 tubos se les incorporo 0,1 ml de la muestra de agua potable.
Se incubaron las muestras a 35ºC por 24 horas en el horno para ver la turbidez del agua, o el gas en la campana Durham (no confundir con burbujas de aire).
Una vez terminado el proceso de incubación, se procede a leer los resultados para verificar la presencia de coliformes fecales y coliformes totales.

Etapa confirmativa
Luego de verificar las muestras que arrojaron positivo, se realiza la inoculación en dos diferentesmedios de cultivo, bilis verde brillante, y Escherichia Coli (caldo E.C).
Fase confirmativa coliformes fecales.
* A partir de los tubos que dieron positiva la fase presuntiva, inocular con dos asadas en el medio E.C.
Se deja incubar por 48 horas a 44.5 ºC en baño María
Fase confirmativa coliformes totales.
* Los tubos que dieron positivos a la etapa presuntiva, se inocularon con 2 asadasen el medio bilis verde brillante.
* Se dejan incubar durante 48 horas a 35 ºC en el horno.

Datos experimentales
Tabla de prueba presuntiva
Tubos de ensayo | Dilución |
1 | 10 -1 |
2 | 10 -1 |
3 | 10 -1 |
4 | 10 -1 |
5 | 10 -1 |
6 | 10-2 |
7 | 10-2 |
8 | 10-2 |
9 | 10-2 |
10 | 10-2 |
11 | 10-3 |
12 | 10-3 |
13 | 10-3 |
14 | 10-3 |
15 | 10-3 |

Tabla N°1:Muestra la dilución realizada en la prueba presuntiva, en los primeros 5 tubos se indica la primera dilución realizada a la menos uno, en los 5 siguientes muestra la segunda dilución realizada a la menos dos, en los últimos 5 tubos muestra la tercera dilución realizada a la menos tres.

Datos bibliográficos
Numero más probable

El método del número más probable es una estrategia eficiente deestimación de densidades poblacionales especialmente cuando una evaluación cuantitativa de células individuales no es factible. La técnica se basa en la determinación de presencia o ausencia en réplicas de diluciones consecutivas de atributos particulares de microorganismos presentes en muestras de suelo u otros ambientes. Por lo tanto, un requisito importante de este método es la necesidad depoder reconocer un atributo particular de la población en el medio de crecimiento a utilizarse. El estimado de densidad poblacional se obtiene del patrón de ocurrencia de ese atributo en diluciones seriadas y el uso de una tabla probabilística.

Algunas de las ventajas del NMP son: la capacidad de estimar tamaños poblacionales basados en atributos relacionados a un proceso (selectividad); por...