no tengo ensayos que comentar

UNIVERSIDAD DE MURCIA. DEPTO. DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR B e INMUNOLOGIA

Prácticas de Laboratorio de Bioquímica
GRADO DE FARMACIA
Curso 2014-2015
DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR B e
INMUNOLOGIA. UNIVERSIDAD DE MURCIA

Prácticas experimentales a realizar:
P1. Medida de pH. Poder regulador. Acción de la lipasa.
P2. Propiedades de aminoácidos y proteínas.
P3.Análisis espectrofotométrico de la concentración de una disolución.
Acción de amilasa sobre el almidón.
P4. Determinación de creatinina en orina y de otros parámetros en sangre.

Datos del alumno
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PRÁCTICA 1.
MEDIDAS DE pH. TAMPONES. SEGUIMIENTO DE LA HIDRÓLISISDE GRASAS
POR LA LIPASA.
INTRODUCCIÓN
La medida del pH de las disoluciones acuosas es una determinación analítica muy útil
en Bioquímica. El valor de pH intra y extracelular condiciona muchas características estructurales y
funcionales de las biomoléculas, y por tanto de proteínas y ácidos nucleicos. Por ello, puede modificar
la actividad metabólica celular y del organismo. En el hombre, esmuy importante el control tanto del
pH plasmático como el del pH intracelular. Así, el plasma presenta un pH casi constante de 7.4, unas
décimas superior al que presenta el medio intracelular de las células sanguíneas y endoteliales. La
sangre constituye un muestra biológica muy asequible para realizar la medida del pH y
simultáneamente un buen vehículo para suministrar eficazmente agentesalcalinizantes o
acidificantes, empleados en estados de acidosis o alcalosis metabólica.
El pH se expresa como pH= −log [H+], y su medida, por tanto, refleja en escala logarítmica
la concentración de protones en un medio, es decir, la acidez. Las medidas de pH se pueden realizar
de modo cualitativo o cuantitativo. Para las medidas poco precisas de pH de una disolución acuosa
se emplean las tirasreactivas de pH, que adquieren una tonalidad entre el rojo y el violeta cuando
se sumergen en ella en función de la acidez del medio. También se pueden utilizar indicadores ácidobase, compuestos que cambian de coloración en función de la acidez del medio en el que están
disueltos. Existen indicadores que viran de color a distintos valores de pH, con colores propios de
cada uno. Para realizarmedidas más cuantitativas del pH de una muestra (incluso con la precisión
de un decimal) se emplean electrodos combinados de vidrio, que dan una respuesta rápida y son
sencillos de utilizar. Los electrodos de vidrio no miden valores absolutos, por lo que hay que
calibrarlos con disoluciones patrón, de pH conocido, previo a su uso. Las condiciones de conductancia
(contenido iónico) de la muestracondicionan la precisión de la medida. Por este motivo, el pH del
agua pura es difícil de medir.
Las disoluciones acuosas pueden variar drásticamente su pH con pequeñas adiciones de un
ácido o una base. Esa variación del valor del pH puede controlarse y limitarse a un rango pequeño
gracias a la acción que desempeñan las disoluciones reguladoras, tampones o buffers. Estos
sistemas estánnormalmente formados por la mezcla de un ácido débil y la sal de su base conjugada
y se encuentran en equilibrio. Las formas ácida y básica se interconvierten tras la adición de H+ u
OH- variando sus proporciones relativas, sin un cambio drástico del pH gracias al equilibrio químico
entre las dos especies del tampón.
El intervalo de pH de la sangre humana que es compatible con la vida estácomprendido entre
6.8 y 7.8. Por ello, la sangre posee sistemas muy eficaces de regular el pH, de tal forma que no varíe

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significativamente frente a un aumento de la concentración de compuestos ácidos o básicos como
consecuencia del metabolismo normal o patológico. En la sangre, el sistema regulador principal es...