parasitologia

TECNICAS DE LABORATORIO PARA DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES PARASITARIAS EN ANIMALES.

Debido a la existencia de infecciones transmitidas en forma natural desde animales vertebrados al hombre y viceversa (zoonosis), la búsqueda de los parásitos se extiende incluso al reservorio animal. Por ejemplo, en toxocariacis y equinococosis se puede solicitar colaboración a los laboratorios de medicinaveterinaria para estudiar las deposiciones de las mascotas (perros). También se pueden estudiar fuentes infectantes, como carnes (triquinosis, sarcocistosis), tierras en el caso de geohelmintiasis (ascariasis, tricocefalosis, toxocariasis) y aguas en el caso de las enteroparasitosis que se transmiten por contaminación fecal.
En nuestro país, la sospecha diagnóstica a nivel de atención primaria esfundamental, dado que es el primer eslabón con el sistema de salud.
El objetivo de las técnicas diagnósticas es pesquisar e identificar al parásito (en cualquiera de sus estados) lo que se realiza con técnicas directas, o a través de técnicas indirectas que evalúan la respuesta inmune del huésped .El hallazgo de una forma parasitaria en cualquiera de sus estados es considerado un diagnósticopatognomónico , en cambio la evidencia de la respuesta inmune positiva hacia un agente parasitario sólo hace posible un diagnóstico presuntivo.

Técnicas directas
Se basan en el diagnóstico morfológico de los distintos estados de los parásitos. Tiene como objetivo pesquisar e identificar distintas formas de protozoos (trofozoíitos , quistes, ooquistes) y helmintos (proglótidas y huevos). Susensibilidad depende de las características de las técnicas, de la carga infectante, de la biología de los parásitos, del transporte y preparación de la muestra, de la implementación de equipos adecuados y de la disponibilidad de tiempo y experiencia de los observadores.




Técnicas indirectas
ELISA Amebiasis podría ser utilizada para el diagnóstico de absceso hepático amebiano, pero hasta elmomento no ha dado buenos resultados en nuestro país, por la alta prevalencia de la infectación que hace que existan muchas personas infectadas asintomáticas con anticuerpos contra E histolytica.Si bien se handescrito han descrito técnicas ELISA para pesquisa de antígeno de Giardia lamblia en deposición, la presencia de poliparasitismo hace que los métodos de Teleman y PAF sean de elección, pues son demenor costo y mayor rendimiento.

HEMOPARASITOS E HISTOPARASITOS
Técnicas directas
Estos métodos se utilizan en la búsqueda de parásitos circulantes en pacientes que están en fase aguda de la infección. Son de utilidad en el diagnóstico de Tripanosomiasis americana (Enfermedad de Chagas) malaria y filariasis.Se emplean las siguientes técnicas:
•Examen de sangre al fresco. Una gota de sangrerecién extraída se observa entre lámina y laminilla, directamente al microscopio.
•Frotis de sangre. Se extiende una gota de sangre recién extraída, sobre un portaobjeto, se tiñe con May Grunwald Giemsa o Wright.
•Gota gruesa. Se colocan tres gotas de sangre en un portaobjeto, se mezcla con movimientos concéntricos con un alfiler o con el extremo de un portaobjeto , se extrae la fibrina. seseca a temperatura ambiente y luego se tiñe
•Microstrout o microhematócrito. Se toma una muestra de sangre en tubo de microhematócrito y se centrifuga a 100 rpm por tres minutos. Se fractura el capilar en el límite de la capa leucocitaria.Se deposita sobre un portaobjeto la capa de leucocitos y plasma y se observa al microscopio.
•Xenodiagnóstico. Esta técnica sólo se utiliza para enfermedad deChagas.Se emplean ninfas de Triatoma spp. libres de infección, las que se alimentan con sangre del paciente.Los resultados se obtienen a los 30, 60 y 90 días.Esta técnica sólo es utilizada en algunos centros de investigación y puede ser reemplazada por PCR para T cruzi.
•PCR Trypanosoma cruzi. Se basa en la pesquisa de fracciones del parásito a partir de secuencias conocidas de su ADN. la...