Practica de cromatologia

UNIVERSIDAD NACIONAL
AUTÓNOMA DE MÉXICO

Escuela Nacional Preparatoria plantel No. 6
“Antonio Caso”

Materia: Biología

Práctica No. 6: Pigmentos fotosintéticos

Profesor: Juan Hernández Delgado

Grupo: 510
Fecha: 10 de Noviembre 2014.

Integrantes:
Olivar Jiménez Claudia Victoria
Pérez Ríos Jessica Pamela
Quiroz Garduño Valeria
Valencia Aguilar Oswaldo

Introducción:Cromatografía:
La cromatografía es un método de análisis químico basado en la separación por métodos de absorción de los componentes de una mezcla fue descubierto en 1909, por el botánico M. Tswestt, que utilizo los principios de la absorción selectiva para separar los pigmentos fuertemente coloreados de las hojas de las plantas.
En esta técnica la fase estacionaria está constituida simplementepor una tira o circulo de papel de filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeñas gotas de una solución de la muestra y evaporando el disolvente luego de cada aplicación. Luego el disolvente o mezcla de disolventes empleada como fase móvil (eluente o eluyente) se hace ascender por capilaridad. Para esto se coloca una porción del papel en contacto con la fase móvil dentro de unrecipiente que la contiene (cámara de desarrollo). Después de unos minutos, cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al borde extremo del papel, se retira el papel y seca.
Pigmentos:
Un pigmento es cualquier sustancia que absorbe luz. El color de un pigmento es el resultado de la longitud de onda reflejada (no absorbida). La clorofila, el pigmento verde de todas las células fotosintéticas.El color verde presente en los vegetales es debido a la presencia de dos pigmentos estrechamente emparentados llamados clorofila a y clorofila b. Pueden formarse en los tallos, hojas y frutos a condición de que los órganos estén situados por encima del suelo y estén expuestos a la luz. En las hojas rojas o amarillas, puede comprobarse la presencia de clorofila que se encuentra enmascarada porlos demás pigmentos.
Los pigmentos se encuentran en el interior de células vegetales, específicamente en organelos llamadas cloroplastos. Los cloroplastos son orgánulos exclusivos de las células vegetales. En ellos tiene lugar la fotosíntesis.
En el método de separación simple, se utiliza como solvente el alcohol etílico y como separador el tetracloruro de carbono. Estos dos solventes orgánicosresponden en forma diferente a los pigmentos clorofílicos como así también a sus diferencias físicas que hacen que sean dos líquidos no miscibles y con diferente densidad.
clorofila a + clorofila b + Tetracloruro de carbono
xantofilas y carotenoides + Alcohol etílico


Objetivo: Extraer, separar e identificar los pigmentos fotosintéticos a través la cromatografía.
Material:
Hojas verdes deun vegetal (se recomienda espinaca).
Mortero.
Vaso de precipitados.
NaOH 20%
Papel para cromatografía (Whatmann).
CaCO3 y alcohol etílico 96°.
Éter de petróleo.
Caja de Petri.
Papel filtro.
Agua destilada.
Desarrollo:
SEPARACIÓN POR CROMATOGRAFÍA.
1. Lavas las hojas recién colectadas, cortarlas en trocitos pequeños, procurando que no haya nerviaciones, y secarlas, lo mejor posible,entre dos hojas de papel filtro.
2. Triturar estos fragmentos en el mortero, añadiendo unos 50 mL de etanol 96°y una pequeñísima cantidad de CaCO3 (la que pueda caber en la punta de la espátula), para evitar la degradación de pigmentos. Seguir triturando hasta que el disolvente tenga el mismo color verde de la hoja.
3. Filtrar con un papel filtro sin excesivos pliegues.
4. Colocar parte delfiltrado en una caja de Petri, hasta que alcance unos 3 o 4 milímetros de altura. Situar sobre él una tira de papel cromatográfico, doblado en v, de forma que se mantenga vertical. Debe evitarse tocar el papel con los dedos en su parte central, y que el papel toque las paredes de la caja.
5. Espere unos veinte minutos, para que los diferentes pigmentos se vayan separando al avanzar por la tira de...