Practica Manejo De Ratones
Páginas: 11 (2703 palabras)
Publicado: 18 de octubre de 2012
Práctica No. 9
Manejo del Ratón como un Modelo de Animales de Experimentación
OBJETIVO
El alumno conocerá la reglamentación y especificaciones técnicas para la producción, cuidado y uso de los animales de laboratorio especificados en la NOM-062-ZOO-1999. Conocerá las diferentes técnicas para el manejo y sujeción de ratones. Realizará la recolección de muestras biológicas (sangre,copro, etc) y disección de órganos.
Introducción
El uso de animales en la investigación y en la docencia involucra una gran responsabilidad por parte del usuario, en el que se debe procurar la mejor calidad de vida para el animal y la selección del mejor método de eutanasia. Actualmente existen alternativas para evitar en la medida de lo posible el uso de animales como el uso demétodos in vitro, cultivos celulares, cadáveres de animales por muerte natural e inclusive simuladores por computadora. Sin embargo, en muchos casos se hace necesario el uso de un modelo animal in vivo, que permita la extrapolación de los resultados hacia otros organismos vivos incluyendo al humano. En estos casos, es obligación del usuario contar con una clara y congruente justificación para suuso. También es de obligación el cumplimiento de las normas vigentes para el uso y manejo de animales.
La Norma Oficial Mexicana para la producción, cuidado y uso de animales de laboratorio (6 de diciembre de 1999), establece las condiciones mínimas para el mantenimiento de animales de laboratorio, en el que se incluye: espacios físicos adecuados para el movimiento de cada especie,ambiente confortable de temperatura, humedad, ventilación, iluminación (control de ciclos de luz-oscuridad), accesibilidad y calidad de alimento y agua, seguridad a prueba de escape, entre otros factores que permiten una buena calidad de vida para cada especie en particular. Por otro lado, se establecen diferentes técnicas experimentales para la administración de fluidos y sustancias y métodosde eutanasia. Así como medidas de bioseguridad y salud ocupacional para el personal involucrado con la producción, cuidad y uso de animales de laboratorio.
Equipo y Materiales
- Microtubos de plástico (eppendorf)
- Guantes de latex
- Protectores de ojos
- Equipo de disección (que contenga por lo menos 1 tijeras y 2 pinzas)
- Tubo cónico de 50 mL perforado en la parte inferior y en latapa
- Bolsa de plástico (ziplook)
- Cama para disección de ratones o base de poliestireno de 20 cm x 20 cm y
1 pulgada grosor.
- Toallas de papel absorbente
- 2 Navajas (nuevas) con lomo de acero
-Microcentrífuga
-Algodón
Animales
-1 ratón macho (mínimo 8 semanas de edad)
Reactivos
- Etanol al 70 %
Procedimiento
Manejo del ratón
1. Coloque al ratón sobre la base de unasuperficie que permita que se sostenga (se puede utilizar la tapadera de la jaula).
2. Con los dedos índice y pulgar sujete la base del cráneo de manera firme para inmovilizar su cabeza.
3. Sujete la cola del ratón con el dedo meñique (figura 1).
[pic]
Figura 1.- Métodos de sujeción y manipulación del ratón
Obtención de sangre de la cola del ratón
1. Una vezsujetado el ratón, realizar un corte pequeño de la cola del animal (de 0.5 cm).
2. Mantenga al ratón en posición vertical con la cola hacia abajo de tal manera que se facilite la recolección de sangre.
3. Obtenga aproximadamente 200 μL de sangre por ratón.en un microtubo de 1.8 mL.). Cada 10- 15 segundos presione suavemente la cola del ratón en dirección al tubo de recolección de sangre(figura 2).
4. Espere de 10 a 20 minutos para que se forme el coagulo.
5. Centrifugue la sangre a 2000 xg x 10min a temperatura ambiente.
6. Transfiera el suero a un tubo limpio y congele a -20 oC.
Eutanasia (tomado de NORMA Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999)
Dislocación cervical.
La dislocación cervical manual ejecutada apropiadamente induce inconsciencia rápidamente, se aplica...
Manejo del Ratón como un Modelo de Animales de Experimentación
OBJETIVO
El alumno conocerá la reglamentación y especificaciones técnicas para la producción, cuidado y uso de los animales de laboratorio especificados en la NOM-062-ZOO-1999. Conocerá las diferentes técnicas para el manejo y sujeción de ratones. Realizará la recolección de muestras biológicas (sangre,copro, etc) y disección de órganos.
Introducción
El uso de animales en la investigación y en la docencia involucra una gran responsabilidad por parte del usuario, en el que se debe procurar la mejor calidad de vida para el animal y la selección del mejor método de eutanasia. Actualmente existen alternativas para evitar en la medida de lo posible el uso de animales como el uso demétodos in vitro, cultivos celulares, cadáveres de animales por muerte natural e inclusive simuladores por computadora. Sin embargo, en muchos casos se hace necesario el uso de un modelo animal in vivo, que permita la extrapolación de los resultados hacia otros organismos vivos incluyendo al humano. En estos casos, es obligación del usuario contar con una clara y congruente justificación para suuso. También es de obligación el cumplimiento de las normas vigentes para el uso y manejo de animales.
La Norma Oficial Mexicana para la producción, cuidado y uso de animales de laboratorio (6 de diciembre de 1999), establece las condiciones mínimas para el mantenimiento de animales de laboratorio, en el que se incluye: espacios físicos adecuados para el movimiento de cada especie,ambiente confortable de temperatura, humedad, ventilación, iluminación (control de ciclos de luz-oscuridad), accesibilidad y calidad de alimento y agua, seguridad a prueba de escape, entre otros factores que permiten una buena calidad de vida para cada especie en particular. Por otro lado, se establecen diferentes técnicas experimentales para la administración de fluidos y sustancias y métodosde eutanasia. Así como medidas de bioseguridad y salud ocupacional para el personal involucrado con la producción, cuidad y uso de animales de laboratorio.
Equipo y Materiales
- Microtubos de plástico (eppendorf)
- Guantes de latex
- Protectores de ojos
- Equipo de disección (que contenga por lo menos 1 tijeras y 2 pinzas)
- Tubo cónico de 50 mL perforado en la parte inferior y en latapa
- Bolsa de plástico (ziplook)
- Cama para disección de ratones o base de poliestireno de 20 cm x 20 cm y
1 pulgada grosor.
- Toallas de papel absorbente
- 2 Navajas (nuevas) con lomo de acero
-Microcentrífuga
-Algodón
Animales
-1 ratón macho (mínimo 8 semanas de edad)
Reactivos
- Etanol al 70 %
Procedimiento
Manejo del ratón
1. Coloque al ratón sobre la base de unasuperficie que permita que se sostenga (se puede utilizar la tapadera de la jaula).
2. Con los dedos índice y pulgar sujete la base del cráneo de manera firme para inmovilizar su cabeza.
3. Sujete la cola del ratón con el dedo meñique (figura 1).
[pic]
Figura 1.- Métodos de sujeción y manipulación del ratón
Obtención de sangre de la cola del ratón
1. Una vezsujetado el ratón, realizar un corte pequeño de la cola del animal (de 0.5 cm).
2. Mantenga al ratón en posición vertical con la cola hacia abajo de tal manera que se facilite la recolección de sangre.
3. Obtenga aproximadamente 200 μL de sangre por ratón.en un microtubo de 1.8 mL.). Cada 10- 15 segundos presione suavemente la cola del ratón en dirección al tubo de recolección de sangre(figura 2).
4. Espere de 10 a 20 minutos para que se forme el coagulo.
5. Centrifugue la sangre a 2000 xg x 10min a temperatura ambiente.
6. Transfiera el suero a un tubo limpio y congele a -20 oC.
Eutanasia (tomado de NORMA Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999)
Dislocación cervical.
La dislocación cervical manual ejecutada apropiadamente induce inconsciencia rápidamente, se aplica...
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