PRACTICA No 4
Páginas: 6 (1297 palabras)
Publicado: 6 de junio de 2015
PRACTICA No. 4 OBSERVACION MICROSCOPICA DE BACTERIAS
UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS
MICROBIOLOGIA
2015
BRENDA JASMIN ROCHA 117003130
RICARDO ANDRES VANEGAS 117003140
WILMER ELIECER ROMERO 117003133
RESUMEN
Inicialmente se debe distinguir entre las diferentes técnicas para observación de microorganismos y las preparaciones para tinción. En esta práctica, se realizo la microscopia óptica debacterias por diferentes técnicas de montaje y las tinciones para la óptima observación. Se describen aquí los resultados obtenidos en el desarrollo de la aplicación de las tinciones usando cultivos puro de Bacillus sp. E. Coli; klebsiella sp. y Staphylococcus sp.
METODOLOGIA
Para la observación de movilidad se hizo por el montaje en fresco; para ello se utilizo el cultivo E. Coli. Se tomo unportaobjetos limpio y se flameo, luego se agrego una gota de agua destilada en el centro del portaobjetos. Después con un asa previamente flameada se cogió una pequeña porción del microorganismo extendiéndola sobre la gota de agua del portaobjetos. Luego cuidadosamente se coloco un cubreobjetos, se agrego aceite de inmersión y se visualizo en 100X.
En el segundo proceso; coloración de Gram setrabajo con cultivos de staphylococcus y E. Coli. Primero sobre un portaobjetos se coloco una gota de agua y una muestra del cultivo que se tomo con un asa flameada. Luego se hizo un frotis y se dejo secar. Después se fijo la muestra pasándola por el mechero; se adiciono cristal violeta durante 1 minuto, se lavo el exceso de colorante con abundante agua. Se añadió el Lugol dejándolo actuar por 1minuto, se descarto el mordiente lavando con agua. Posteriormente se adiciono el Alcohol Acetona para que actuara durante 20 segundos e igualmente se lavo la lámina; por último se agrego el colorante fuscina durante 20 segundos, se lavo la muestra y se dejo secar al aire. Se coloco una gota de aceite de inmersión y se observo en 100X. Para la tinción negativa sobre un portaobjetos se coloco una gota detinta china, luego con el asa previamente flameada se tomo una muestra de Klebsiella depositándola sobre la gota de tinta china, luego con otro portaobjetos se distribuyo a través de todo el portaobjetos. Se dejo secar. Para la tinción de endosporas se tomo con un asa una muestra de Bacillus y se realizo un frotis, se fijo y dejo secar. Luego, se agrego Verde Malaquita y se calentó durante 5minutos evitando que se seque. Por último se lavo con agua la lámina, se dejo secar al ambiente.
RESULTADOS
1. MOVIMIENTO
Se observaron las bacterias de la E. Coli en constante movimiento, s observaron pequeños filamentos alrededor del cuerpo de estas a lo que responden que son los flagelos por medio de los cuales se mueven.
En la tinción de Gram para la E. Coli se observo como los bacilos dela bacteria tomaron la coloración rosa. Aunque también se observo en partes como contaminación (levaduras en gemación).
También al llevar al microscopio se observo que la coloración fue muy fuerte, es decir, su coloración fue un rosa muy oscuro.
IMAGEN No. 1 Bacterias E. Coli vistas al microscopio tras ser teñidas con la coloración de Gram.
En la misma coloración para el cultivo deStaphylococcus aureus la coloración de los cocos se aprecio que fue de color morado, también se observo que estaban agrupados por racimos y pares.
Por otra parte, en la coloración negativa de la klebsiella se aprecio como la tinta china ennegreció el medio, y el colorante permite resaltar las bacterias y capsulas.
IMAGEN 2. Klebsiella sp. En la tinción negativa.
Así mismo en la tinción de endosporasse observaron bacilos teñidos de rosa pero su interior no fue posible visualizar muy bien el color verde característico en este caso.
DISCUSIONES
Al tomar el cultivo en el cual estaba los microorganismos de E. Coli por sus características era Agar Endo puesto que sus colonias eran rosadas con un brillo verde metálico característico, debido a la elevada producción de ácidos y aldehídos.(1) por...
UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS
MICROBIOLOGIA
2015
BRENDA JASMIN ROCHA 117003130
RICARDO ANDRES VANEGAS 117003140
WILMER ELIECER ROMERO 117003133
RESUMEN
Inicialmente se debe distinguir entre las diferentes técnicas para observación de microorganismos y las preparaciones para tinción. En esta práctica, se realizo la microscopia óptica debacterias por diferentes técnicas de montaje y las tinciones para la óptima observación. Se describen aquí los resultados obtenidos en el desarrollo de la aplicación de las tinciones usando cultivos puro de Bacillus sp. E. Coli; klebsiella sp. y Staphylococcus sp.
METODOLOGIA
Para la observación de movilidad se hizo por el montaje en fresco; para ello se utilizo el cultivo E. Coli. Se tomo unportaobjetos limpio y se flameo, luego se agrego una gota de agua destilada en el centro del portaobjetos. Después con un asa previamente flameada se cogió una pequeña porción del microorganismo extendiéndola sobre la gota de agua del portaobjetos. Luego cuidadosamente se coloco un cubreobjetos, se agrego aceite de inmersión y se visualizo en 100X.
En el segundo proceso; coloración de Gram setrabajo con cultivos de staphylococcus y E. Coli. Primero sobre un portaobjetos se coloco una gota de agua y una muestra del cultivo que se tomo con un asa flameada. Luego se hizo un frotis y se dejo secar. Después se fijo la muestra pasándola por el mechero; se adiciono cristal violeta durante 1 minuto, se lavo el exceso de colorante con abundante agua. Se añadió el Lugol dejándolo actuar por 1minuto, se descarto el mordiente lavando con agua. Posteriormente se adiciono el Alcohol Acetona para que actuara durante 20 segundos e igualmente se lavo la lámina; por último se agrego el colorante fuscina durante 20 segundos, se lavo la muestra y se dejo secar al aire. Se coloco una gota de aceite de inmersión y se observo en 100X. Para la tinción negativa sobre un portaobjetos se coloco una gota detinta china, luego con el asa previamente flameada se tomo una muestra de Klebsiella depositándola sobre la gota de tinta china, luego con otro portaobjetos se distribuyo a través de todo el portaobjetos. Se dejo secar. Para la tinción de endosporas se tomo con un asa una muestra de Bacillus y se realizo un frotis, se fijo y dejo secar. Luego, se agrego Verde Malaquita y se calentó durante 5minutos evitando que se seque. Por último se lavo con agua la lámina, se dejo secar al ambiente.
RESULTADOS
1. MOVIMIENTO
Se observaron las bacterias de la E. Coli en constante movimiento, s observaron pequeños filamentos alrededor del cuerpo de estas a lo que responden que son los flagelos por medio de los cuales se mueven.
En la tinción de Gram para la E. Coli se observo como los bacilos dela bacteria tomaron la coloración rosa. Aunque también se observo en partes como contaminación (levaduras en gemación).
También al llevar al microscopio se observo que la coloración fue muy fuerte, es decir, su coloración fue un rosa muy oscuro.
IMAGEN No. 1 Bacterias E. Coli vistas al microscopio tras ser teñidas con la coloración de Gram.
En la misma coloración para el cultivo deStaphylococcus aureus la coloración de los cocos se aprecio que fue de color morado, también se observo que estaban agrupados por racimos y pares.
Por otra parte, en la coloración negativa de la klebsiella se aprecio como la tinta china ennegreció el medio, y el colorante permite resaltar las bacterias y capsulas.
IMAGEN 2. Klebsiella sp. En la tinción negativa.
Así mismo en la tinción de endosporasse observaron bacilos teñidos de rosa pero su interior no fue posible visualizar muy bien el color verde característico en este caso.
DISCUSIONES
Al tomar el cultivo en el cual estaba los microorganismos de E. Coli por sus características era Agar Endo puesto que sus colonias eran rosadas con un brillo verde metálico característico, debido a la elevada producción de ácidos y aldehídos.(1) por...
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.