Precipitación isoeléctrica de la caseína de la lech

Precipitación isoeléctrica de la caseína de la leche
Universidad Nacional Autónoma de México. Facultad de Ciencias.
Licenciatura en Biología. Biología Molecular de la Célula I.


Introducción:En las proteínas, como en los aminoácidos y en cualquier molécula anfotérica, las cargas pueden ser neutralizadas de manera tal que las cargas netas sean igual a cero. Este proceso se realiza almodificar el pH del medio en el que se encuentren estas moléculas. En el caso especial de las proteínas, se aprovecha esta propiedad para purificarlas. Si en una mezcla de proteínas se alcanza el puntoisoeléctrico de una de ellas, ésta se precipita, mientras que el resto quedan disueltas. La razón es que la composición química de casa proteína es característica y presenta un número distinto degrupos ionizables que se neutralizan a diferentes pH. La caseína es una de las fosfoproteínas de la leche que se precipita a pH de 4.8. Esta propiedad se puede explotar para purificar simplemente alacidificar el medio.

Objetivo
Aislar la caseína de la leche por el método de precipitación por punto isoeléctrico.

Hipotesis
La proteína de la caseína se precipita al exponerse a un medio de HCL al2% a partir de los 3 mL al obtener un pH menor a 5.

Resultados
Se prepararon 3.6 g de leche en polvo en 65 ml de agua destilada y posteriormente se realizó una dilución 1:4. La dilución tuvo unpH inicial de 7.02, por lo que se tituló con 3 mL HCL al 2% hasta observar la formación de grupos y haber llegado a un pH de 4.50
HCL 2% (mL)
pH
Cambios observados
1
6.25
No se observan cambios.2
5.30
Se distinguen dos partes en la muestra.
3
4.50
La caseína se precipita por completo.
Tabla 1. Titulación de la caseína.
El peso inicial del papel filtro fue de 0.583g, al finalizar elexperimento el eso total del papel filtro y el precipitado de caseína fue de 1.1018g, por lo que el valor neto de la caseína obtenida fue de 518.8mg.
Peso del papel filtro (g)
Peso del papel filtro...