Preparación de medios de cultivo

Práctica I. Preparación de medios de cultivo

Introducción.
Para crecer las células necesitan una variedad de nutrimentos orgánicos e inorgánicos; Los nutrimentos orgánicos, al igual que losinorgánicos, se requieren en dos niveles: uno macro y otro micro. Generalmente las células en crecimiento pueden fabricar sus proteínas a partir de fuentes adecuadas de nitrógeno y carbohidratossuministrado por el medio de cultivo, existen además una cantidad de sustancias orgánicas adicionales que se requieren en cantidades mínimas y que son activas en el crecimiento. En esta práctica se prepararontres medios de cultivo (Agar-YPD, Caldo nutritivo, Agar-Sangre). (Krikorian, 1991).

Objetivos
Se pretenden prepara 3 medios de cultivo:
1. Agar - YPD…………. (170 ml) – Sólido.
2. Caldonutritivo……….( 70 ml) - Líquido.
3. Agar-sangre………..…(170 ml) – Sólido .
Metodología y materiales
Agar – YPD
Se pesan los siguientes Reactivos:

Agar Bacteriológico………….. 3.4 gr.
Aguadestilada………………..170 ml.
Dextrosa……………………... 3.4 gr.
Extracto de levadura…………..1.7 gr.
Pentona……………………......3.4 gr.

Se utilizan los siguientes Materiales:
1 Barra magnética.
10 Cajas Petri.
1 Matraz Erlenmeyer……………250ml.
1 Parrilla con agitación eléctrica.
1 Probeta……………………… 250 ml.
1 Tapón.
1 Varilla magnética.
Se elabora un tapón con algodón envuelto de pañolina ya que al poner un tapón de corcho hay laposibilidad de que el tapón se desprenda del matraz Erlenmeyer.












Se deposita el agua destilada en el matraz Erlenmeyer, enseguida se depositan la dextrosa, la peptona y el extractode levadura, se calienta la solución en la parrilla a una temperatura de 120°C con una agitación moderada, hasta que la solución sea completamente miscible (es decir, desaparezcan los grumos de lasolución); cuando la solución sea completamente miscible se deposita el Agar bacteriológico, con el propósito que la solución no se solidificara al calentar. Se esteriliza el medio de...