Procedimientos Generales De Laboratorio, Uso De Equipo, y Consideraciones De Seguridad

Procedimientos Generales de Laboratorio, Uso de Equipo, y Consideraciones de Seguridad 

Arturo Duarte Ortuño

I. Procedimientos de Seguridad

 A. Químicos

Un número no definido de químicos usados en cualquier laboratorio de biología molecular son peligrosos. Todos los fabricantes de materiales peligrosos son requeridos por ley de surtir al usuario con información pertinente de cualquierpeligro asociado con sus químicos. Ésta información es surtida en forma de Hojas de Datos de Seguridad de los Materiales o MSDS. Ésta información contiene el nombre químico, CAS#, datos de peligro a la salud, incluyendo tratamientos de primeros auxilios, datos físicos, datos de fuego y peligro de explosión, datos de reactividad, procedimientos para derrame o fuga, y cualquier precaución especialnecesaria cuando se manipule este químico. Un archivo conteniendo información de MSDS de las sustancias peligrosos debe mantenerse en el laboratorio. Además, la información de MSDS puede ser consultada en el internet. Es extremadamente necesario de hacer uso de esta información previamente al uso de un nuevo químico y sin duda en el caso de cualquier exposición accidental o derrame. Elinstructor/encargado de laboratorio debe ser notificado inmediatamente en el caso de un accidente que envuelva cualquier reactivo potencialmente peligroso.
Los siguientes productos químicos son particularmente notables:
• Fenol - puede causar quemaduras graves
• La acrilamida - neurotoxina potencial
• El bromuro de etidio – Cancerígeno

Estas sustancias no son dañinas si se utilizan adecuadamente: usesiempre guantes cuando se utilizan productos químicos potencialmente peligrosos y nunca pipeteé con la boca alguno de ellos. Si accidentalmente derrama cualquiera de estos productos químicos en la piel, inmediatamente enjuague el área completamente con agua e informe al instructor. Desechar los residuos en contenedores adecuados.

B. Luz Ultravioleta

La exposición a la luz ultravioleta puedecausar irritación ocular aguda. Dado que la retina no puede detectar la luz ultravioleta, puede tener lesiones oculares graves y no se dan cuenta hasta 30 minutos a 24 horas después de la exposición. Por lo tanto, use siempre protección ocular adecuada cuando se utilizan lámparas de rayos ultravioleta.

C. Electricidad

Las tensiones para la electroforesis son suficientes para causarelectrocución. Cubrir los embalses de amortiguación durante la electroforesis. Siempre apague la fuente de alimentación y desenchufe los cables antes de quitar un gel.

D. Limpieza general

Todas las áreas comunes deben estar libres de desorden y de utensilios sucios, equipo de electroforesis, etc. deben ser tratados adecuadamente. Dado que usted tiene sólo una cantidad limitada de espacio parallamarla propia, es a su ventaja de mantener su propia área limpia. Dado que va a utilizar las instalaciones comunes, todas las soluciones y todo lo almacenado en una incubadora, nevera, etc deben estar etiquetados. A fin de limitar la confusión, cada persona debe utilizar sus iniciales o de la denominación única para el etiquetado de otros platos, etc material sin etiqueta en los refrigeradores,incubadoras, o congeladores que pueden ser destruidos. Siempre se marca la parte posterior de las placas con sus iniciales, la fecha y los datos experimentales relevantes, por ejemplo, los números de cepa.

II. Preparación de Soluciones

A. Cálculo de Molar, % y Soluciones "X".

 1. Una solución molar es una en la cual 1 litro de solución contiene el número de gramos igual a su peso molecular. Ej.Para preparar 100 ml de una solución 5M NaCl = 58.456 (peso molecular del NaCl) g/mol x 5 moles/litro x 0.1 litros = 29.29 g en 100 ml de solución.
2. Soluciones %. Porcentaje (peso/volumen) = peso (g) en 100 ml de solución; Porcentaje (volumen/volumen) = volumen (ml) en 100 ml de solución. Ej. Para preparar una solución 0.7% de agarosa en buffer TBE, pesar 0.7 de agarosa y llevarla a un...