Pruebas Serologicas

Pruebas diagnósticas basadas
en la respuesta inmunitaria

1

¿Por qué utilizamos el diagnóstico inmunológico?

• El diagnóstico clínico no suele ser definitivo.
• Las lesiones histológicas pueden ser indicativas pero pocas veces
son patognomónicas
• A veces, el diagnóstico microbiológico es lento, complicado o
imposible

Principales motivos de utilización del diagnósticoinmunológico

2

Intensidad de la respuesta

Respuesta secundaria

Respuesta primaria

IgG>>IgM

IgM>>
IgG

Periodo de inducción
(0-14 días)

Tiempo

Esquema de la respuesta inmune primaria y secundaria

3

Título: Máxima dilución a la cual un suero continúa siendo positivo
en una prueba serológica determinada

Intensidad de la respuesta

Seroconversión: Aumento del título deanticuerpos x4 o paso de
negativo a positivo

Seroconversión

Tiempo

Conceptos de título de anticuerpos y seroconversión

4

Conceptos básicos
• Las IgM normalmente reflejan una infección reciente
• El aumento del título de anticuerpos indica una infección
reciente
• A veces, simplemente con determinar un título elevado
podemos suponer que se ha producido una infección reciente
•Los títulos de IgG por sí solos suelen indicar uan infección
pasada

Conceptos básicos de interpretación de resultados

5

1. Pruebas basadas en la detección de anticuerpos

6

Pruebas de aglutinación
Se utilizan con antígenos particulados tales como una suspensión bacteriana.
Detectan preferentemente IgM

+

Rosa de Bengala (brucelosis)

Este tipo de pruebas suele serextremadamente sensible pero,
al mismo tiempo suele padecer
de falta de especificidad por el
hecho de ser mayoritariamente
IgMs lo que se detecta

Pruebas de aglutinación: Se basan en la unión de antígenos particulados a los
anticuerpos, preferentemente de clase IgM. Suele tratarse de pruebas muy
sensibles pero con poca especificidad. Ejemplos de este tipo de pruebas es la
aglutinación con rosade Bengala empleada en el diagnóstico de la brucelosis.

7

Pruebas de precipitación
Se utilizan con antígenos solubles a los que se permite difundir en una
matriz semisólida

Línea de precipitación

Inmunodifusión en gel de agar

Se trata de pruebas relativamente sensibles y específicas pero con un elevado
componente subjetivo y muy engorrosas

Pruebas de precipitación: En estecaso se utilización antígenos solubles que se
difunden frente a los anticuerpos. La unión antígeno-anticuerpo precipita de
forma visible y permite establecer la presencia de anticuerpos específicos. Un
ejemplo clásico de este tipo de pruebas es la inmunodifusión en gel de agar
utilizada históricamente en el diagnóstico de la leucosis bovina.

8

Fijación del complemento
La fijación delcomplemento se basa en la capacidad del complemento para
unirse a los complejos antígeno-anticuerpo. La prueba incluye la adición de
eritrocitos sensibilizados con una hemolisina. Si el suero posee anticuerpos
específicos, se fija el complemento y no puede unirse a la hemolisina para
lisar los eritrocitos. Se trata de una prueba muy específica.
C
+
Suero

C

positivo
Antígeno

ne
gC

C positivo

C
ati
v

C

C

o

C
C

positivo

negativo

C

ne
g

ati
v

o

C
C

C
C

Fijación del complemento: Como hemos visto en capítulos anteriores, el
complemento posee la capacidad de unirse a los complejos antígeno anticuerpo
(fijación). Esta capacidad es aprovechada en la prueba de fijación del
complemento. Metodológicamente, la prueba sedesarrolla en dos fases, una
primera que es una reacción antígeno anticuerpo en un medio líquido y una
segunda consistente en la adición de complemento, una hemolisina dependiente
de complemento y eritrocitos. Si se ha producido reacción antígeno-anticuerpo,
es decir, si el suero analizado contenía anticuerpos frente al antígeno, el
complemento queda fijado y no puede activar la hemólisis de los...