PURIFICACION PROTÍNAS
Páginas: 2 (267 palabras)
Publicado: 24 de marzo de 2013
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
La mayoría de las investigaciones bioquímicas requieren la purificación de las proteínas, lo que supone tener en cuenta que estas moléculas puedenser inestables o encontrase en bajas concentraciones.
El conocimiento y caracterización de las proteínas de un organismo requiere la identificación de la secuencia deaminoácidos, la cual se relaciona con el gen que la codifica, por ello las técnicas de purificación y aislamiento de proteínas son esenciales.
Los objetivos de la purificación son:Identificar la función de la proteína, ej. enzima
Identificar la estructura de la proteína
Utilizar la enzima para crear un producto deseado
Sintetizar un producto comercial, comopor ejemplo, de diagnóstico o terapéutico
Reconstruir las rutas metabólicas que ocurren en la célula, para lo que son necesarios enzimas puros que permitan realizar un estudio dela cinética de la reacción.
Estudiar las desviaciones del metabolismo normal.
Uso de enzimas como catalizadores (lipasas, proteasas, etc..) y en terapias (insulina, interleucinas)Obtener proteínas recombinantes.
Consideraciones a tener en cuenta:
La purificación debe ser simple, minimizando el numero de pasos y evitando manipulaciones que no seanreproducibles.
Evitar técnicas caras, siempre que sea posible el uso de otras más baratas.
Optimización de cada paso
Empleo de técnicas y aparatos fiables
El mejor método depurificación es áquel que suponga menos pasos y coste, y mayor rendimiento y enriquecimiento.
El grado de pureza necesario depende de la finalidad de la proteína purificada.Los procesos se caracterizan por comenzar con una primera etapa de extracción, seguida de unas fases de comprobación de la presencia de la proteína y de su actividad enzimática.
La mayoría de las investigaciones bioquímicas requieren la purificación de las proteínas, lo que supone tener en cuenta que estas moléculas puedenser inestables o encontrase en bajas concentraciones.
El conocimiento y caracterización de las proteínas de un organismo requiere la identificación de la secuencia deaminoácidos, la cual se relaciona con el gen que la codifica, por ello las técnicas de purificación y aislamiento de proteínas son esenciales.
Los objetivos de la purificación son:Identificar la función de la proteína, ej. enzima
Identificar la estructura de la proteína
Utilizar la enzima para crear un producto deseado
Sintetizar un producto comercial, comopor ejemplo, de diagnóstico o terapéutico
Reconstruir las rutas metabólicas que ocurren en la célula, para lo que son necesarios enzimas puros que permitan realizar un estudio dela cinética de la reacción.
Estudiar las desviaciones del metabolismo normal.
Uso de enzimas como catalizadores (lipasas, proteasas, etc..) y en terapias (insulina, interleucinas)Obtener proteínas recombinantes.
Consideraciones a tener en cuenta:
La purificación debe ser simple, minimizando el numero de pasos y evitando manipulaciones que no seanreproducibles.
Evitar técnicas caras, siempre que sea posible el uso de otras más baratas.
Optimización de cada paso
Empleo de técnicas y aparatos fiables
El mejor método depurificación es áquel que suponga menos pasos y coste, y mayor rendimiento y enriquecimiento.
El grado de pureza necesario depende de la finalidad de la proteína purificada.Los procesos se caracterizan por comenzar con una primera etapa de extracción, seguida de unas fases de comprobación de la presencia de la proteína y de su actividad enzimática.
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