Quimica Clinica


Quimica Clinica
I. Instrumentación y procedimientos analiticos.

A) Espetrofotometria
a. La energia radiante se caracteriza como un espectro de un largo de onda corto a largo: cosmico,gama,rayos-X,ultraviolet,visible,infrarojo,microondas,radioondas.
b. Largo de onda- es la distancia recorrida por un ciclo de onda completo.( Distancia entre dos crestas sucesivas) se mide en nanometros.c. El largo de onda corto es la mayor energia contenida en la luz y el mayor numero de protones.
d. La luz se clasifica de acuerdo a su largo de onda: UV( ultravioleta)-> tiene es largo de onda mas corto e infrarojo el mas largo. Todos los largos de ondas visibles (400-700) son combinados,resultando un color blanco.
e. El color visible- largo de onda transmitido ( no absorbido) por un objeto.f. Las particulas de luz se les llama fotones. Cuando un atomo absorbe un foton, el atomo se excita en una de tres formas: el electron se mueve a un nivel de energia mayor, el modo de la vibracion del enlace covalente cambia o la rotacion alrededor del enlace covalente cambia.
g. Cuando la energia es absorbida como foton, el electron que se mueve al estado mas alto de enrgia se vuelve inestable.1. Un electron exitado no es estable y regresa al “groundstate”
2. Un electron puede emitir energia en forma de luz ( radiante) por la caracteristica de su largo de onda.
3. La absorcion o emission de energia forma un espectro de linea que es caracteristico de una molecula y ayuda a indentificar la molecula.
B) Espectrofotometro
a. El espectrofotometro mide la luz transmitida por un analitoen la solucion. El analito puede absorber,transmitir y reflejar la luz en varios grados.
b. Componentes del espectrofotometro-> Energia-luz-puerto de entrada-monocromador-puerto de salida- cuveta-fotodetector-read
c. La fuente de energia o lampara de exitacion produce una intense, reproducible y contaste emission de luz.
d. Hay dos tipos de lamparas: Tungsten: es la mas comun, usada en regionsvisibles e infrarojos. Deuterium: usada en la region ultravioleta.
e. Cuando una lampara es cambiada el instrument debe ser recalibrado, por que un cambio en la fuente de energia cambia en angulo de luz.
F) Los monocromadores son filtros de cristal e interferencias, se usan en los fotometros.
G)Diffraction gratins y primas se usan en espectrofotometria
D) Nephelometria- es la medida de la luz“scattered” por una particular en una solucion. Generalmente la scaterred light se mide en un angulo de luz incidente en donde las particulas mas pequeñas estan envueltas.La cantidad de scatter es directamente proporcional al # y tamaño de particulas presentes en una solucion. La sensitividad depende de la ausencia del background scatter de las cuvetas y los reagents particulados.
E) Turbidimetria-mide la luz bloqueda, es una disminucion en la luz transmitida atraves de una solucion: depende del tamano de la particular y concentracion. Usa un espectrofotometro para medir y es limitado por la accuracy y sensitividad del intrumento.
F)Espectrocospia de emission Molecular- tipos de luminicencia donde la exitacion require absorcion de energia radiante.
1) Fluorescencia- proceso en donde losatomos absorben energia en un largo de onda particular, los electrons suben a orbitales altos de energia y regresan al estado ground emitiendo luz de un largo de onda largo y poca energia. La luz emitidida tiene una vida corta.
2.)Una de las ventajas es que la fluorometria es 1000 veces mas sensitive que las tecnicas de absorcion y esto incremente especificidad por que los largos de ondasoptimos se escojen por la absorcion y monitoreo.
3.)Limitaciones es que cambios en el protocol afecta ph.temperatura y calidad del solvente.
G)Electroforesis
1. Separa e identifica proteinas, incluyendo suero,orina y CSF proteinas,lipoproteinas,isoenzimas.
2. Se define como el movimiento de la carga de las moleculas en un medio liquid cuando un campo electric es aplicado.
3.La zona de...