Quimica sanguinea

Química Sanguínea
Introducción:
La química sanguínea es un examen que utiliza reacciones químicas para analizar la sangre de un paciente.
Es uno de los exámenes más importante y más tedioso que se realiza dentro de un laboratorio.
A continuación se darán las técnicas para obtener TODOS los parámetros solicitados en una Química Sanguínea.

Objetivo

Que el alumno aprenda a realizar unaquímica sanguínea y reconozca los valores normales y elevados, para así dar un buen diagnostico y tratamiento.
Material
Espectrofotómetro
Cubetas para espectro
Tubos de ensayo
Gradillas
Mechero de Bunsen
Trípie
Tela de alambre
Cristalizadores
Termómetro
Pipetas Pasteur
Pipetas de 10ml, 5ml, 0.1ml
Pipetas automáticas
Sangre

CREATININA:
Fundamento: En 1886 Jaffe describe unmétodo para la determinación de creatinina haciendo reaccionar un filtrado libre de proteínas con ácido pícrico en una solución alcalina. Aunque desde entonces se han descrito muchos métodos, la reacción clásica de Jaffe es la más utilizada.
Esta reacción esta sujeta a interferencias a causa de varias sustancias como proteínas y glucosa.
Para combatir esta desventaja, se han desarrolladomodificaciones. Los métodos cinéticos son los más utilizados por ser más rápidos, simples y sin interferencias.
La creatinina reacciona con el ácido pícrico en un medio alcalino para formar un complejo de color el cual absorbe a 510nm. La velocidad de formación del color es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra.

TÉCNICA:
Coloque las cubetas del espectrofotómetro a 37º C.

Lleve acero el espectrofotómetro con un blanco de agua destilada a 510nm.

Pipetee 1 ml del reactivo en cada cubeta y preincube por 3 minutos a 37º C.

Transfiera 0.05ml del estándar en el tubo de ensayo, mezcle inmediatamente y pase a una celdilla de lectura.

Transcurridos exactamente 20 segundos, lea y registre absorbancia (A1)

Exactamente 60 segundos después de la lectura inicial lea yregistre la absorbancia final (A2)

Calcule el cambio de absorbancias A restando (A1 - A2)
Control de calidad:
Incluya en cada corrida de muestras un suero control y/u orina con valores conocidos analizados por este método.
RESULTADOS:
Los valores resultan de comparar el cambio de absorbancia (A) de la muestra (M) con el estándar (S) tratado de la forma idéntica.
VALORES NORMALES:
Hombres(Suero) 0.9 - 1.5 mg/dl
(Orina) 1000 - 2000 mg/24 horas
Mujeres (Suero)
0.7 - 1.4 mg/dl
(Orina) 600 - 1500 mg/24 horas
GLUCOSA:
Fundamento: La determinación de los niveles de glucosa fue el primer procedimiento empleado en el laboratorio clínico medico. La metodología de la glucosa-oxidasa fue introducida por Keilin y Hartree en 1948. Más tarde Keston reportó el uso de un reactivo combinadoglucosaoxidasa-peroxidasa, seguido por el de Teller adicionando un reactivo cromogénico al procedimiento de Keston
La glucosa es oxidad en presencia de glucosa oxidasa (GOD). El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la influencia de peroxidasa (POD) con fenol y 4aminoantipirina para formar un complejo rojo-violeta de quinona. La intensidad del color es proporcional a la concentración deglucosa.

MATERIAL: REACTIVOS:
Espectrofotómetro capaz de ab. de 500nm Glucosa Liquicolor ®
Pipetas automáticas Estándar de glucosa (100mg/dl)
Mechero de Bunsen
Trípie
Tela de alambre
Cristalizadores
Cubetas para espectro
Agitador
Cronometro
TÉCNICA:
Coloque en cubetas los siguientes volúmenes (ml) y mezcle bien.
| REACTIVO BLANCO (RB) | ESTANDAR (E) | MUESTRA (M) |REACTIVOESTANDARMUESTRA | 1.0-- | 1.00.01- | 1.0-0.01 |

Incube las cubetas a 37º C por 5 minutos o a temperatura ambiente 15-30º C por 10 minutos.

Lea E y M contra RB a 500 nm antes de 60 minutos.

CONTROL DE CALIDAD: Se deben incluir dos sueros control con niveles de glucosa conocidos determinados por este método o por el procedimiento de hexocinasa en cada serie de pruebas. Se recomienda el uso de...