quimico biologo



MANUAL DE LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA









1 DE MARZO deL 2013
MORELOS # 12 COLONIA CENTRO IGUALA GRO






Coprocultivo
Exudado faringeo
Exudado nasal
Exudado otico
Cultivo de expectoración
Búsqueda de bacilos ácido alcohol resistentes
Urocultivo
Exudado vaginal
Exudado uretral
Espermocultivo
Cultivo de heridas y secreciones
Hemocultivo
Cultivo delíquidos sinovial
Cultivos de líquidos cefalorraquídeo
Antibiograma













COPROCULTIVO:

Introducción:

Las enfermedades del sistema digestivo representan una de las principales causas de defunción en el mundo.
Ciertos microorganismos afectan el tracto gastrointestinal y producen enfermedad, la cual se manifiesta en la mayoría de los casos por diarrea.

Los microorganismosbacterianos mas frecuentes que producen enfermedades gastro intestinales son: salmonella, shigella y Escherichia coli (algunos serotipos). Son menos frecuentes Yersinia enterocolitica, VIbrio parahaemolyticus y Campylobacter jejuni. En caso de epidemia vibrio cholera y en muy raras ocasiones Aeromonas y plesiomonas.

Por lo tanto, para poder determinar cual es el agente etiológico de laenfermedad y sirva como apoyo al diagnostico clínico, hay que realizar un coprocultivo. Este se lleva acabo en el laboratorio con una muestra de materia fecal, la cual debe colocarse en un recipiente estéril.
Para la siembre debe tomarse el inoculo de las porciones sanguinolentas o mucosas, pues estos sitios son abundantes en microorganismos patógenos. Cuando se trata de lactantes la muestra se debe tomardirectamente del recto rotando barias veces con hisopo. Es necesario sembrar la muestra inmediatamente después de haber sido recolectada o en caso contrario refrigerarla.

MATERIAL BIOLÓGICO. Muestras fecal en un frasco estéril.

MEDIOS DE CULTIVO

Agar SS
Agar XLD
Agar Mac conkey o EMB
Agar Sulfito de bismuto

MEDIOS PARA PRUEBAS BIOQUÍMICAS

Medio Mio
Medio Lia
Medio MR-VPCitrato de simmons
Agar kligler
Caldo malonato
Caldo urea
Caldo base rojo de fenol más sacarosa
Agar fenilalanina
Gelatina nutritiva

REACTIVOS

Azul de metileno loeffler
Reactivo de kovacs
Rojo de metilo
Solución de alfa-naftol al 5%
Solución de KOH al 40%

MATERIALES VARIOS

Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Hisopos estériles
Mechero

PROCEDIMIENTO

1-EXAMENMACROSCOPICO DE LA MUESTRA

Observar el aspecto y la consistencia de la muestra, si hay presencia de moco y sangre.

2-EXAMEN MICROSCOPICO

A) Colocar una pequeña porción de heces sobre un portaobjetos, con un aplicador de madera mezclar muy bien con 2 o 3 gotas de azul de metileno loeffler

B)Colocar un porta objetos y después de 2 a 3 minutos observar al microscopio con el objetivo secofuerte, para identificar leucocitos, que se presentan cuando algunas bacterias invaden el colon, como salmonella, shigella, yersinia y E. Coli.. Entero invasiva







CULTIVO:

1-Con un hisopo estéril, tomar una pequeña porción de materia fecal (de preferencia donde hay moco y sangre)

2-Descarga el inoculo en una placas para aislamiento primario y una placa de aislamiento selectivo,3-Después de haber descargado la muestra en cada uno de los medios, el hisopo utilizado se introduce en el caldo de enriquecimiento y se incuba de 6 a 18 horas a 37 º C

4-En las cajas con el inoculo hacer estrías cruzadas, para obtener aislamiento de las colonias.

5-Incubar las placas a 37º C durante 24

6-Resembrar la muestra con el hisopo que se incubo en el caldo de enriquecimiento, enlos medios SS y agar sulfito de bismuto.incubar las cajas a 37º C durante 24 horas.

7-Revisar las placas, observar la morfología colonial, buscar las colonias de bacteria patógenas y sembrar pruebas bioquímicas para su identificación. Incubar durante 24 horas a 37º C.

8-Leer las pruebas bioquímicas e identificar mediante las tablas.

REPORTAR EL COPROCULTIVO DE LAS SIGUIENTE FORMA...