reaccion en cadena de la polimerasa
ANALISIS ELECTROFORÉTICO DEL ADN
INTRODUCCION:
La electroforesis constituye parte importante del procedimiento rutinario del análisis de los ácidos nucleicos y proteínas. Y asícomo el microscopio permite visualizar microorganismos y estructuras similares, la electroforesis nos ayuda a observar los ácidos nucleicos y proteínas al final del procedimiento.
El principiobásico de la electroforesis consiste en la migración de las moléculas a través de un gel u otro tipo de matriz de naturaleza porosa, en el cual, por acción de un campo eléctrico, serán separadas de acuerdoa su tamaño (peso molecular), forma y carga neta (a mayor carga neta, la molécula migrará más rápido; a mayor fricción, la movilidad será menor). La movilidad de las partículas está determinada deforma proporcional al voltaje aplicado y la carga neta de la molécula y de forma inversamente proporcional a la fricción de la molécula; esta última depende de la forma y el tamaño de la misma.Generalmente, se usan dos tipos: de agarosa y acrilamida. La agarosa se emplea para separar fragmentos de ADN con tamaños de 100 pares de bases hasta 20 kilobases. Los geles de acrilamida se usan en elrango de >200 pares de bases.
Para controlar el avance de la separación de las moléculas en la matriz y establecer un patrón de fragmentos, las moléculas deberán ser teñidas con diferentescolorantes. Estos pasos facilitan la visualización de las moléculas a manera de simples bandas las cuales serán posteriormente analizadas e interpretadas. Las bandas del ADN o fragmentos de un determinadotamaño pueden observarse en estos geles al intercalar moléculas de bromuro de etidio. El bromuro de etidio se une al ADN y emite una coloración naranja cuando se coloca en un transiluminador con luzultravioleta.
Es importante señalar que la electroforesis en asociación con otras técnicas tales como PCR, e hibridación, brinda una gran ayuda en el campo de la salud. Gracias a esta técnica es...
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